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2009 Fiscal Year Annual Research Report

新規RNAポリメラーゼII結合因子による遺伝情報発現の協調的制御機構の解明

Research Project

Project/Area Number 20570162
Research InstitutionUniversity of Toyama

Principal Investigator

広瀬 豊  University of Toyama, 大学院・医学薬学研究部, 准教授 (00218851)

Keywords遺伝子発現 / 転写 / RNAプロセシング / RNAポリメラーゼII / リン酸化 / WWドメイン / Pin1 / PCIF1
Research Abstract

RNAポリメラーゼII(Po1 II)は、遺伝子発現において中心的な働きをしており、その最大サブユニットカルボキシル末端領域に、転写中にダイナミックなリン酸化を受けるCTDと呼ばれる特殊な構造を有している。リン酸化CTDは、様々なRNAプロセシングやクロマチン修飾に関与する因子の足場として機能し、転写とこれらの過程の共役に重要な役割を果たしている。本研究は、私がこれまでに同定したリン酸化CTD結合WWドメイン蛋白質(PCIF1、Pin1、WWOX)の機能検索を行うことによって、遺伝子発現諸過程の協調的制御機構を解明することを目的としている。
本年度は以下のような新たな知見を得た。(1)PCIF1ノックアウトDT40細胞株を用いた昨年度までの解析において、脊椎動物Pin1がPCIF1の細胞機能を相補できる可能性が示唆された。そこでヒトPin1とPCIF1の機能比較を行った。その結果、ヒトPin1はPCIF1と同程度にPo1 IIの転写活性を抑制出来ること、また両者のWWドメインは、様々なWWドメインの中で最も類似した標的特異性を示すことを見いだした。(2)Pin1およびWWOXと相互作用する新規核内因子の探索を、GST融合WWドメインタンパク質を用いたプルダウン解析によって行った。その結果、遺伝子発現制御に関わる複数の核内複合体の構成因子がPin1やWWOXのWWドメインによって共沈した。ノコダゾール処理細胞抽出液を用いたプルダウン解析によって、Pin1の相互作用はすべてリン酸化に依存し、WWOXの相互作用はリン酸化に依存する場合と依存しない場合があることが示唆された。興味深いことに、リン酸化RNAポリメラーゼIIが両者に共通して共沈し、mRNA前駆体3'プロセシング複合体の構成因子がWWOXのWWドメイン特異的に共沈した。

  • Research Products

    (13 results)

All 2009

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (11 results)

  • [Journal Article] Prolyl isomerase Pin1 shares functional similarity with phosphorylated CTD interacting factor PCIF1 in vertebrate cells2009

    • Author(s)
      Yunokuchi I.
    • Journal Title

      Genes to Cells 14

      Pages: 1105-1118

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] RNAポリメラーゼII-CTDリン酸化制御による転写とmRNAプロセシングの共役2009

    • Author(s)
      広瀬豊
    • Journal Title

      蛋白質・核酸・酵素 54

      Pages: 2080-2085

  • [Presentation] ヒトPin1およびWWOXの新規核内標的因子の探索2009

    • Author(s)
      熊野御堂悠
    • Organizer
      第32回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20091209-20091212
  • [Presentation] ニワトリDT40細胞株を用いたリン酸化CTD結合蛋白質PCIF1の機能解析2009

    • Author(s)
      長田愛乃
    • Organizer
      第32回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20091209-20091212
  • [Presentation] リン酸化RNAポリメラーゼII結合蛋白質PCIF1の機能解析2009

    • Author(s)
      岩本悠
    • Organizer
      第32回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20091209-20091212
  • [Presentation] 脊椎動物CTDフォスファターゼSsu72の遺伝子発現制御における機能2009

    • Author(s)
      広瀬豊
    • Organizer
      第32回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20091209-20091212
  • [Presentation] 脊椎動物CTDフォスファターゼSsu72の遺伝子発現制御における機能2009

    • Author(s)
      和仁翔太郎
    • Organizer
      第82回日本生化学学会大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20091021-20091024
  • [Presentation] Functional characterization of the vertebrate phosphorylated CTD-interacting protein PCIF1.2009

    • Author(s)
      Hirose Y.
    • Organizer
      11th Cold Spring Harbor Meeting on Mechanisms of Eukaryotic Transcription
    • Place of Presentation
      Cold Spring Harbor(NY)
    • Year and Date
      20090825-20090829
  • [Presentation] ニワトリDT40細胞株を用いたリン酸化CTD結合蛋白質PCIF1の機能解析2009

    • Author(s)
      長田愛乃
    • Organizer
      第11回日本RNA学会年会
    • Place of Presentation
      新潟
    • Year and Date
      20090727-20090729
  • [Presentation] リン酸化RNAポリメラーゼII結合蛋白質PCIF1の機能解析2009

    • Author(s)
      岩本悠
    • Organizer
      第11回日本RNA学会年会
    • Place of Presentation
      新潟
    • Year and Date
      20090727-20090729
  • [Presentation] CTDフォスファターゼSsu72の遺伝子発現制御における機能2009

    • Author(s)
      広瀬豊
    • Organizer
      第11回日本RNA学会年会
    • Place of Presentation
      新潟
    • Year and Date
      20090727-20090729
  • [Presentation] リン酸化RNAポリメラーゼII結合蛋白質PCIF1の機能解析2009

    • Author(s)
      岩本悠
    • Organizer
      遺伝情報DECODE・冬のワークショップ
    • Place of Presentation
      越後湯沢
    • Year and Date
      20090119-20090121
  • [Presentation] 脊椎動物リン酸化RNAポリメラーゼII制御因子の機能解析2009

    • Author(s)
      広瀬豊
    • Organizer
      遺伝情報DECODE・冬のワークショップ
    • Place of Presentation
      越後湯沢
    • Year and Date
      20090119-20090121

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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