2010 Fiscal Year Annual Research Report
核膜周辺に存在するクロマチン境界領域の同定とその構造の解明
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20570188
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| Research Institution | University of Hyogo |
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Principal Investigator |
廣瀬 富美子 兵庫県立大学, 大学院・生命理学研究科, 准教授 (60208882)
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| Keywords | 核膜 / クロマチン境界領域 / ヘテロクロマチン / 転写因子 / SUMO化修飾 |
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| Research Abstract |
本研究ではDREFをノックダウンしたときに生じる核内の構造とクロマチンの変化を詳細に解析し、hDREFのクロマチンの活性と構造の制御において果たす役割を明らかにすることをめざした。本年度までに得た結果から、hDREFは核膜直下におけるクロマチンの動態制御に関与していることが強く示唆された。
本年度はhDREFの核膜直下での機能を知るためのアプローチとしてhDREFの相互作用因子の探索に着手した。Flag-hDREFを発現させたHeLa細胞の核抽出液を用いてhDREFと相互作用する因子を免疫沈降し質量分析により新たな相互作用因子を2つ同定した。同定した因子のうちのひとつは、核膜直下や核小体周辺などヘテロクロマチンが多い領域への局在が顕著であった。今後はこの因子が直接クロマチンに結合していることを証明したうえでこの因子の結合しているクロマチン領域を同定していく予定である。また、今年度はhDREFが他のたんぱく質をSUMO修飾するSUMOリガーゼ活性を保有することを発見し、hDREFのSUMO修飾の標的たんぱく質のひとつが、ヘテロクロマチンの形成に関わるクロマチン再構成因子Mi2αであることを見つけた。このことから、hDREFはSUMO化修飾を介してMi2αの機能を阻害し、ゲノムのヘテロクロマチン化を負に制御しているのではないかという今後の研究を進めるうえで重要な仮説を立てることができた。さらに、核膜直下に存在し、核構造のみならず、クロマチンおよびクロマチン結合因子との相互作用を介して遺伝子の転写調節に関わることがわかっているlamin A/CもhDREFによってSUMO化を受けることを示唆する予備的な結果も得た。
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