2010 Fiscal Year Annual Research Report
新規メラノーマ転移遺伝子プロテオリピドプロテインの解析
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20590069
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
園田 よし子 慶應義塾大学, 薬学部, 教授 (30050743)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
笠原 忠 慶應義塾大学, 薬学部, 教授 (60049096)
多胡 めぐみ 慶應義塾大学, 薬学部, 講師 (30445192)
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| Keywords | PLP2 / FAK / melanoma / B16F10 / B16BL6 / metastasis |
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| Research Abstract |
我々は接着斑キナーゼFAKの925のチロシンをフェニルアラニンに変異させたFAK(925FAK)を過剰発現させたメラノーマ細胞は、C57BL/6Nマウスを用いた実験的肺転移モデルにおいて、転移能が大きく低下することを見いだした。次に925FAK細胞でproteolipid protein 2(PLP2)の発現が低下していることを見いだした。これらの結果よりPLP2の転移における機能解析を計画した。すなわち、PLP2を過剰発現させたマウスメラノーマ細胞(B16F10)を作成し、尾静脈注入による実験的肺転移モデルにおいて転移を上昇させるか調べた。その結果、肺転移を大きく上昇させた。さらに自然転移実験に用いられるメラノーマ細胞であるB16BL6を用い、PLP2のメラノーマ自然転移に及ぼす影響を調べた。その結果、PLP2過剰発現メラノーマ細胞は、膝下リンパ節への転移が大きく上昇した。これらの結果はPLP2の転移促進因子としての可能性を示唆している。さらにPLP2のsiRNAによりPLP2発現が抑制されたメラノーマ細胞をマウス足踵に注入し、自然転移に及ぼす影響を調べた。その結果、コントロールに比べ、PLP2発現が抑制されたメラノーマ細胞は、膝下リンパ節への転移が有意に減少した。今年度はさらに接着斑キナーゼFAKのsiRNA発現ベクターを作製しB16-BL6メラノーマ細胞にトランスフェクトしPLP2発現が抑制されたメラノーマ細胞を作製した。さらにFAK発現が抑制されたメラノーマ細胞をマウス足踵に注入し、自然転移に及ぼす影響を調べた。その結果、コントロールに比べ、FAK発現が抑制されたメラノーマ細胞は、膝下リンパ節への転移が有意に減少した。その減少はPLP2とほぼ同程度であった。
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