2008 Fiscal Year Annual Research Report
アストロサイトにおける酸化ストレスによるDNA修復酵素とヌクレオシド輸送体の変化
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20590098
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| Research Institution | Hyogo University of Health Sciences |
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Principal Investigator |
田中 康一 Hyogo University of Health Sciences, 薬学部, 助教 (30274848)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西山 信好 兵庫医療大学, 薬学部, 教授 (20201692)
佐藤 友昭 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 教授 (10284887)
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| Keywords | アストロサイト / 酸化ストレス / 過酸化水素 / DNA修復酵素 / DNAポリメラーゼβ / ヌクレオシド輸送体 / CNT / ENT |
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| Research Abstract |
活性酸素種により障害されたDNAの修復において、ヌクレオシド輸送体の意義を明らかにする目的でその活性化機構とDNA修復酵素の機能及び遅発性細胞死との関連性を検討した。
ラット培養アストロサイトは神経細胞とは異なり、活性酸素種によりヌクレオシド輸送体の活性化を引き起こした。これはリボヌクレオシドレダクターゼ阻害薬であるHydroxyureaによる影響を全く受けないことから細胞増殖以外の目的で活性化されている。
ヌクレオシド輸送体には細胞外液のNa^+に依存するConcentrative Nucleoside Transporter (CNT)と平衡型のEquilibrative Nucleoside Transporter (ENT)が知られているが、RT-PCRによりラット培養アストロサイトにはCNT1は存在せずCNT2、ENT1, ENT2が存在することを明らかにした。また、活性酸素種によるヌクレオシド輸送体の活性化を過酸化水素(H_2O_2)によるチミジン取り込みで評価したところ、細胞外液Na^+の除去及びENT阻害薬であるNBMPR、Dipyridamole、Dilazepにより濃度依存的に抑制された。さらに、H_20_2による遅発性細胞死に対するCNT、ENTの関与を細胞生存性の評価により検討したところ、それら輸送体活性を抑制することにより遅発性細胞死は促進された。
DNA修復酵素としてはポリメラーゼβ(polβ)が知られているが、RT-PCRによりラット培養アストロサイトに存在することを明らかにした。また、polβ阻害薬であるd_2TTPによりH_2O_2によるチミジン取り込みは濃度依存的に抑制され、遅発性細胞死は促進された。
以上より、活性酸素種によるヌクレオシド輸送体を介するチミジン取り込みの促進は、DNA修復酵素の活性と関連し遅発性細胞死に影響を与える可能性が示唆された。
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