2009 Fiscal Year Annual Research Report
マリファナ乱用防止のためのEBM:分子薬理学・生化学・毒性学的研究
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20590130
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| Research Institution | Kyushu University of Health and Welfare |
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Principal Investigator |
山本 郁男 Kyushu University of Health and Welfare, 薬学部, 教授 (50069746)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宇佐見 則行 九州保健福祉大学, 薬学部, 講師 (60257483)
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| Keywords | 大麻 / カンナビノイド / アロマターゼ / 17β-ヒドロキシステロイド脱水素酵素(17β-HSD) / テトラヒドロカナビノール(THC) / カンナビノール(CBN) / カンナビジオール(CBD) / ステロイド代謝 |
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| Research Abstract |
【目的】我々は、大麻(マリファナ)主成分が生体内において多くの代謝物を生成することを明らかにしてきたが、内分泌撹乱化学物質様作用についてはこれまでに報告が一部あるが、その詳細は不明であった。また、テストステロンおよびアンドロステンジオンのエストロンおよびエストラジオールへの芳香化に関与するCYP19は、主要カンナビノイドによる阻害については一部報告があるものの、マリファナ三大主成分の詳細な代謝についてはこれまでに報告がない。我々は平成20年度の研究成果として、大麻主成分テトラヒドロカンナビノール(THC)、カンナビジオール(CBD)、カンナビノール(CBN)がCYP19(アロマターゼ)による代謝過程でTHCおよびCBDが芳香環化されCBNに変換されることを報告した。このことから、生体内におけるCYP19による芳香化が明確となった。今回、CYP19によるTHCおよびCBDの芳香化が認められたことから、これらカンナビノイドのCYP19による代謝が性ホルモンの合成系に関与することが示唆された。本年度は、CYP19の関与するアンドロステロン(AND)→エストロン(E1)およびテストステロン(TES)→エストラジオール(E2)の代謝に及ぼすこれらカシナビノイドの影響について検討すると共に、17β-ヒドロキシステロイド脱水素酵素(17β-HSD)によるAND→TESおよびE1→E2の代謝に及ぼす影響についても併せて検討したので報告する。【実験方法】THC、CBDおよびCBN(100μM)は、40 pmol Human CYP19(BD Biosciences),1.3mM NADP^+,0.4U/mL G-6-P dehydrogenase,3.3mM MgCl_2を含む100mMリン酸緩衝液(pH7.4)0.25mL、37℃で30分間反応した。反応終了後、反応混液を酢酸エチル3mLで抽出、有機層をエバポレートし、TMS化した。なお、TMS化は反応生成物の残渣をCH_3CN 15μLに溶解後,BSTFA(N,O-Bis(trimethlsilyl trifluoroacetoamide)15μLおよびTMCS(Trichloromethylsilane)5μLを加え、60℃で1時間反応を行った。CH_3CN 100μLに溶解し、10μLをGC/MSに注入し分析した。《GC/MS測定条件》装置:Agilent 6890N GC/JMS-AMSUN200、カラム:HP-5(0.25mm i.d.X 30m,膜圧0.25μm)、カラム温度:180-280℃(10℃/minで昇温)、注入口および検出器温度:300℃、イオン化:70eV、キャリアーガス(流速):He(1mL/min)の条件下測定を行った。【結果・考察】TESの酸化的代謝では、THC、CBD、CBNによって濃度依存的に有意な阻害が認められた。このことから、ANDからE2への代謝経路においても影響を及ぼすことが示唆された。TESのCYP19によるアロマターゼ活性の阻害は、THC、CBD、CBNにより各々16、60、46%であり、ANDでは各々7、73、79%であった。CBDおよびCBNはCYP19による両活性に対して有意な阻害を示した。一方、ANDの17β-HSD活性は、THC、CBD、CBNによりすべて約20%、E1では各々22、30、22%と有意な阻害を示した。このことは、大麻乱用者では、これらカンナビノイドが性ホルモンの生成に何らかの影響を及ぼしていると考えられる。現在、代謝物を含めたマリファナ成分の内分泌撹乱化学物質様作用を明らかにするため、エストロゲン受容体との相互作用を検討中である。
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Research Products
(5 results)
