2008 Fiscal Year Annual Research Report
薬物動態関連酵素の遺伝子多型とバリアント酵素機能の解析
| Project/Area Number |
20590154
|
|---|
| Research Institution | Tohoku University |
|---|
Principal Investigator |
平塚 真弘 Tohoku University, 大学院・薬学研究科, 准教授 (50282140)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 崇光 東北薬科大学, 薬学部, 助手 (20382674)
|
|---|
| Keywords | ゲノム / 酵素 / 薬剤反応性 / 遺伝子 / 蛋白質 |
|---|
| Research Abstract |
これまでに日本人集団で同定されているCYP2D6バリアントアレル17種類について、遺伝子多型が酵素機能に与える影響をin vitroで検証した。まず、ヒト肝cDNAライブラリーを鋳型として、野生型及びバリアントCYP2D6発現クローン(CYP2D6*2、*10、*14A、*14B、*18、*27、*36、*39、*47、*48、*49、*50、*51、*53、*54、*55及び*57)を作製した。野生型及びバリアントCYP2D6をCOS7細胞で発現させ、遠心法によりミクロソーム画分を調製した後、抗CYP2D6抗体を用いたイムノブロット法により発現タンパク質を確認した。次に得られた各発現タンパク質を用いてCYP2D6の特異的な基質であるBufuralol及びDextromethorphanをin vitro代謝させ、各バリアント酵素のキネティックパラメータ(Km、Vmax)を算出した。
その結果、野生型及び今回構築したすべてのバリアントCYP2D6の発現が確認できた。CYP2D6発現量は大部分のバリアントにおいて有意な低下が認められた。また、酵素活性測定の結果、酵素機能が野生型と同程度のバリアント4種類(CYP2D6.2、27、39及び48)、低下あるいは欠損するバリアント12種類(CYP2D6.10、14A、14B、18、36、47、49、50、51、54、55及び57)、上昇するバリアント1種類(CYP2D6.53)を明らかとした。これらのアレルを有する場合、CYP2D6で代謝される薬物の体内動態が変化し、副作用発現や薬効に影響を及ぼす可能性が示唆された。
|
-
-
[Journal Article] Functional characterization of 17 CYP2D6 allelic variants (CYP2D6.2, 10, 14A-B, 18, 27, 36, 39, 47-51, 53-55, and 57)2008
Author(s)
作山佳奈子、平塚真弘, ら
-
Journal Title
Drug Metabolism and Disposition 36
Pages: 2460-2467
Peer Reviewed
-
-
-
