2009 Fiscal Year Annual Research Report
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20590234
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
磯部 芳明 Nagoya City University, 大学院・医学研究科, 助教 (70094357)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中西 真 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (40217774)
飛田 秀樹 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00305525)
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| Keywords | 概日リズム / 細胞周期 / ES細胞 / 分化 / 時計遺伝子 |
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| Research Abstract |
生物は内因性の時計を持ち、概日(約24時間)リズムを形成している。リズム発現に必要で充分な要素が既に出生前に発現する可能性があり、また細胞周期と概日リズムは時計関連遺伝子産物を介して密接に関連している事を私どもも報告してきた。そこで、本研究では胎生幹細胞(ES細胞)に着目し、時計遺伝子発現と細胞周期調節因子の関連性を検討した。胎生期(E)14日目のラット脳から生後に視交叉上核となる部位(P2)から細胞を採取し、浮遊培養法で細胞を維持した。2回目のpassageの後に継時的に得た試料の時計遺伝子Per2とBmal1および細胞周期の抑制因子p53とWee1のmRNAをReal Time PCR法で定量した。試料採取日は生後1-2日目に相当しPer2は9時と15時に21時や3時より高い傾向で、Wee1は逆位相を示した。この事は、他の脳部位由来の細胞では認められなかった。また、分化が進んだ状態では9:00、 21:00共にPer2とBmal1のmRNAの発現量はneurosphere由来の細胞(浮遊細胞)より多かった。さらに、Wee1とp53のmRNAは分化が進んだ状態では少なく発現する傾向であった。以上と併行して継時的に得た試料のMicro array (32, 590 genes)解析を行った。クラスター分析をした結果、興味ある現象が認められ、いまReal Time PCRで確認を行っている。今回の結果を含め、これまでのデータを論文にまとめる予定。
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