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2008 Fiscal Year Annual Research Report

新しいペプチド探索法:遺伝子情報からのアミド型生理活性ペプチドの予測

Research Project

Project/Area Number 20590248
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

木村 定雄  Chiba University, 大学院・医学研究院, 教授 (40134225)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 粕谷 善俊  千葉大学, 大学院・医学研究院, 准教授 (70221877)
西山 真理子  千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教 (00092081)
KeywordsG蛋白質共役受容体 / GPCR / オーファン受容体 / 生理活性ペプチド / ゲノム構造 / バイオインフォーマティクス
Research Abstract

本研究は、生理活性ペプチドにはC末端部アミドを持つ例が多いことに注目し、ヒトゲノムDNA配列情報より、すべてのアミド型のGPCRの新規生理活性ペプチドリガンド探索を行う。特に、ロドプシン型受容体βグループのオーファン受容体に焦点を当てて研究を行った。(1)ヒトゲノムデータベース等のBankに登録されたDNA配列(33.119個)の情報から、独自に開発したコンピューター検索ソフトにより、C末端部にアミドを持つ生理活性ペプチド候補(352個)を予測抽出した。(2)アミド型活性ペプチド候補(リガンドライブラリー)を約200個化学合成した。(3)次に、ロドプシン型受容体βグループに属するオーファン受容体遺伝子9個を取得し、安定発現細胞に導入した。(4)ブタ脳の酸-アセトン抽出物より、ペプチド性分画を取得し、逆相系HPLCにより360分画に分離した。(5)活性測定(スクリーニング)系として、オーファン受容体の発現細胞を用いて、fura-2/AMを用いた細胞内Ca^<2+>や濃度変化を追跡した。(6)今年度は、オーファン受容体、ヒトGPR176を用いて、スクリーニングを行ったが、合成ペプチド約200個、およびブタ脳抽出物の分画物の中には、活性を持つ物が検出できなかった。引き続いて、他のオーファン受容体の発現細胞を用いてスクリーニングを継続中である。

  • Research Products

    (3 results)

All 2009 2008 Other

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Impaired Placental Neovascularization in Mice with Pregnancy-Associated Hypertension2008

    • Author(s)
      Furuya M, Ishida J, Inaba S, Kasuya Y, Kimura S, Nemori R, Fukamizu A
    • Journal Title

      Laboratory Investigation 88

      Pages: 416-429

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 未知のモルモットβ1-adrenergic receptor遺伝子のクローニングとその機能解析2009

    • Author(s)
      高橋裕美、田中芳夫、木村定雄、小池勝夫、粕屋善俊
    • Organizer
      日本薬理学会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      2009-03-17
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.m.chiba-u.jp/class/bunsiseitai/research-new.htm

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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