2008 Fiscal Year Annual Research Report

神経変性疾患における封入体の役割と結合異常タンパク質の同定

Research Project

Project/Area Number	20590335
Research Institution	Hirosaki University
Principal Investigator	丹治邦和 Hirosaki University, 大学院・医学研究科, 助教 (10271800)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	若林孝一弘前大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50240768) 今泉忠淳弘前大学, 大学院・医学研究科, 助教 (90232602) 吉田秀見弘前大学, 大学院・医学研究科, 講師 (40201008) 松宮朋穂弘前大学, 大学院・医学研究科, 助教 (30344592)
Keywords	脳神経疾患 / 蛋白質
Research Abstract	申請者らは、最近、αシヌクレイノパチー(パーキンソン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症)の細胞内封入体の構成タンパク質のひとつ「NUB1」を見出した。本年度は主に下記1および2を行った。概ね計画通り進行し、成果が出ている。 1、αシヌクレイノパチー脳を用いたNUB1のリン酸化、ユビキチン化に関する検討上述の病変部位ならびに正常対照の凍結脳組織から5mL/g(volume/weight)を低張溶液、界面活性剤溶液、SDS溶液、尿素溶液を用いて順次溶解し、抽出した各サンプルをWestern blotにより解析した。その結果、レビー小体型認知症では、尿素画分においてNUB1の量が増加していることが明らかとなった。しかし正常対照例と比較して、分子量に差が認められないことから、不溶性NUB1はユビキチン化およびリン酸化修飾の可能性は低いと考えられた。 2、NUB1トランスジェニックマウスを用いた病理学的・行動学的検討 Thy1遺伝子のプロモーターを利用してヒトNUB1を神経細胞に発現するための発現カセットの作成が完了した。マウス誕生後、病理学的、生化学的、行動学的検討を行う。一方、既に飼育しているαシヌクレイントランスジェニックマウスを用いて、病理学的および生化学的検討をおこなったところ、シナプスにNUB1の異常蓄積が認められた。このような変化は対照例では認められなかった。興味深いことに、αシヌクレイノパチーの患者脳でも、動物モデルで認められた変化を確認した。