2008 Fiscal Year Annual Research Report
パラミクソウイルスの膜融合における受容体結合蛋白と膜融合蛋白の相互作用の分子機構
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20590470
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
鶴留 雅人 Mie University, 大学院・医学系研究科, 准教授 (50159042)
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| Keywords | パラミクソウイルス / PIV5 / F蛋白 / HN蛋白 / 細胞融合 / 多核巨細胞 / 受容体 / 蛋白間相互作用 |
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| Research Abstract |
1.ヒトパラインフルエンザ2型ウイルス(HPIV2)とパラインフルエンザ5型ウイルス(PIV5)のF蛋白のアミノ酸配列のアラインメントを行い、PIV5のF蛋白の一次構造におけるF1中央領域(aa.223-366)を同定した。次に分子モデルを用いてPIV5のF蛋白3量体の立体構造におけるF1中央領域の位置を視覚化し、この領域のうち3量体の表面に露出しているアミノ酸群の位置を明らかにした。
2.三量体表面に露出しているF1中央領域のアミノ酸群を4つのドメイン(M1〜M4)に区分けした。この区分けに際しては、各ドメインが少なくとも10個の露出したアミノ酸から構成されていること,ドメインの両端のアミノ酸群がPIV5とシミアンウイルス41(SV41)のF蛋白間で保存されていることを条件とした。
3.前項(2)で区分けしたPIV5のF蛋白上のドメインを単独に、あるいは組み合わせてSV41のF蛋白の相同ドメインで置き換えたキメラF蛋白群を作製した。これらのキメラF蛋白とSV41のHN蛋白をHeLa細胞に共発現させたところ、2つのドメイン(M1とM2)をSV41のF蛋白のものに置き換えたキメラF蛋白が細胞融合を誘導することが判明した。また,3つのドメイン(M1,M2およびM4)をSV41のF蛋白のものに置き換えたキメラF蛋白もSV41のHN蛋白との共発現で細胞融合を誘導したが、微弱ながらHN非依存性の細胞融合誘導能を示すことが判明した。なお,これら2つのキメラF蛋白はPIV5のHNとの共発現でも細胞融合を誘導する能力を維持していた。
4.以上の結果から、F蛋白上のM1ドメイン(aa 234-246)とM2ドメイン(aa 278-285)がHN蛋白との相互作用に関わっていることが示唆された。
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