HIV-1Nefによるマクロファージの自然免疫機能撹乱とエイズ病態形成の機構

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20590481
• Research Institution: National Institute of Infectious Diseases
• Principal Investigator: 横田 恭子 National Institute of Infectious Diseases, 免疫部, 室長 (20182701)
• Keywords: 病原性 / 自然免疫機能障害

Research Abstract

HIV-1のコードするNefは長らくエイズ病態形成への関わりが示唆されながらも実際の生体内での役割が未だに明白でないアクセサリー蛋白である。我々は、Nefの任意発現制御が可能な組換えアデノウイルスを作製してマイクロアレイ解析を行い、ヒトマクロファージ(Mf)でNefが高度に発現するとMfの自然免疫機能に関わる遺伝子(TLR5やIL-10Rβ等)の発現が低下することを観察した。本研究では、MfにおけるNef発現が実際にMfの自然免疫機能を障害するかどうかをin vitroで明らかにするとともに、ヒト血液系細胞が分化増殖する免疫不全マウス(ヒト化マウス)の体内においてHIV-1感染時のNef発現がMf機能に及ぼす影響を解析することを目的とした。今年度は、まず単球系の細胞株でNef発現量とTLR5のmRNAおよび蛋白発現低下のパターンを解析し、アレイの結果と一致することを確認した。しかしながら、強制的に発現させたTLR5はNefの抑制効果を受けなかったことから、TLR5の発現抑制はNefの間接的作用であることが示唆された。次に、初期培養MfにTLR5のリガンドであるflagellinを作用させた時に誘導される6種類の炎症性サイトカイン産生の違いをTLR4のリガンドで発現により低下する傾向があった。一方、ヒト臍帯血より分画したCD34陽性幹細胞を移入したヒト化マウスでヒト血液細胞の分化増殖を解析し、3か月以降にはヒトT細胞の増殖が確認されたため、蛍光標識HIV-1を感染させて生体内でのウイルス増殖と組織分布を多重染色フローサイトメーター及びqRT-PCR法でモニターする系を確立した。今後はNef発現によるMfのTLR5発現低下とサイトカイン産生変化に加え、Salmonella菌をモデルにしたphagocytosis機能の解析を行い、ヒト化マウスにおけるNefの作用を検証していく。

Research Products

• [Journal Article] Selective transmission of R5 HIV-1 over X4 HIV-1 at the dendritic cell-T cell infectious synapse is determined by the T cell activation state (2009)
  • Author(s): Yamamoto, T., Tsunetsugu-Yokota, Y., Mitsuki, Y-Y, Mizukoshi, F., Terahara, K., Inagaki, Y., Yamamoto, N., Kobayashi, K., Inoue, J-I.
  • Journal Title: PLoS Pathogen 5 Pages: e1000279
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Activation of HIV-1 Gag-specific CD8^+ T cells by yeast-derived VLP-pulsed dendritic cells is influenced by the level of mannose on the VLP antigen (2009)
  • Author(s): Mizukoshi, F., Yamamoto, T., Mitsuki, Y-y., Terahara, K., Kawana-Tachikawa, A., Kobayashi, K., Iwamoto, A., Morikawa, Y., Tsunetsugu-Yokota, Y.
  • Journal Title: Microbes Infect 11 Pages: 191-197
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Erythromycin-derivatives inhibit HIV-1 replication in macrophages through modulation of MAPK activity to induce small is oform of C/EBP□. (2008)
  • Author(s): Komuro, I., Sunazuka, T., Akagawa, S. K., Tsunetsugu-Yokota, Y., Iwamoto, A., Omura, S.
  • Journal Title: PNAS 105 Pages: 12509-12514
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Nef蛋白質発現に伴うマクロファージの自然免疫機能異常に関する解析 (2008)
  • Author(s): 水越文徳、山本拓也、光木裕也、寺原和孝、小林和夫、横田(恒次)恭子
  • Organizer: 第22回日本エイズ学会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2008-11-27
• [Presentation] 樹状細胞の抗原提示に伴う感染シナプスを介したR5型HIV-1選択的伝播機構の解析 (2008)
  • Author(s): 山本拓也, 光木裕也, 水越文徳, 寺原和孝, 稲垣好雄, 山本直樹, 横田(恒次)恭子
  • Organizer: 第56回ウイルス学会
  • Place of Presentation: 岡山市
  • Year and Date: 2008-10-28
• [Presentation] HIV-1 Nef dysregulates the innate immune function of macro phages (2008)
  • Author(s): Terahara, K., Mizukoshi, F., Yamamoto, T., Mitsuki, Y-Y, Tsuchiya, T., Kobayashi, K., Tsunetsuau-Yokota, Y.
  • Organizer: The 8^<th> Awaji International Forum of Infection and Immunity
  • Place of Presentation: 兵庫県淡路市
  • Year and Date: 2008-09-10
• [Book] Transmission of HIV from dendritic cells to CD4^+ T cells : a promising target for vaccination and therapeutic intervention"in AIDS vaccines, HIV receptors and AIDS research (2008)
  • Author(s): Tsunetsugu-Yokota, Y., Kendow, L. B., ed.
  • Total Pages: 12
  • Publisher: Nova Biomedical Books Inc.