2010 Fiscal Year Annual Research Report
マイコプラズマ由来リポプロテインの肺炎病態形成における機能解析と治療戦略
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20590938
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
桑野 剛一 久留米大学, 医学部, 教授 (60215118)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木田 豊 久留米大学, 医学部, 講師 (30309752)
清水 隆 久留米大学, 医学部, 助教 (40320155)
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| Keywords | Mycoplasma pneumoniae / 肺炎 / リポプロテイン / TLR / 感染症 / 抗体 / サイトカイン |
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| Research Abstract |
我々が既に報告したMycoplasma pneumoniae(M.p)由来の炎症誘起物質であるリポプロテインFAM、N-ALPについて、下の項目の結果を得た。
(1) FAMのELISAによる検出
前年度、FAMの配列から2箇所、抗体エピトープ(aa123-140、aa162-180)を選択して、ウサギポリクローナル抗体を作成した。本年度、同様なエピトープに対して、マウスモノクローナル(MAb)抗体の製作に成功した。前者エピトープに対しては、13株(IgGアイソタイプ:12株、IgMアイソタイプ:1株)、後者に対しては8株(IgG:5株、IgM:3株)の細胞株を樹立した。これらのMAbは、ウエスタンブロットでFAMを検出することができた。ところが、ウサギポリクローナル抗体と同様にサンドイッチELISAを構築したが、FAM抗原の検出感度は、ウサギポリクローナル抗体のそれより低かった。
(2) M.p感染細胞におけるFAM、N-ALPの免疫染色による検出
マウス由来の腹腔滲出単球のM.p感染細胞では、FAM、N-ALPに対するウサギポリクローナル抗体は、それぞれ、特異的に抗原を検出できた。しかし、マウスのM.p感染肺組織では、明らかなFAM、N-ALP抗原を検出できなかった。また、マウスMAbは、エピトープ(aa123-140)を認識するIgMアイソタイプが感染細胞のFAM抗原を検出した。しかし、他のMAbはFAM抗原を検出できなかった。
(3) FAM20(FAMの合成リポペプチド)の機能解析
M.p肺炎の症例においては、一過性の肝障害を認めることがあり、マウスモデルで肝障害を認めるか検討した。in vitroで十分な活性を有するFAM20をマウスの尾静脈より投与したが、肝機能障害マーカーの上昇を認めなかった。血清中にFAM20の阻害因子が存在する可能性が示唆された。
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