2009 Fiscal Year Annual Research Report
摂食抑制ホルモンNesfatin-1の細胞内シグナル伝達経路の解明
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20591045
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
橋本 貢士 Gunma University, 大学院・医学系研究科, 助教 (30396642)
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| Keywords | Nesfatin-1 / シグナル伝達 / 受容体 / 遺伝子 / 摂食抑制 / G蛋白共役型受容体 |
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| Research Abstract |
我々は昨年度、Nesfatin-1及びNesfatin-1の活性中心であるM30を添加するとマウス神経芽細胞腫由来の細胞(MNB)内のCRE binding protein(CREB)のリン酸化が増加するというデータを取得した。その結果、MNB細胞膜上にNesfatin-1特異的受容体が存在することが示唆された。これに基づき、本年度我々はMNB細胞膜を用いてNesfatin-1特異的受容体の探索を実施した。^<125>I-Nesfatin-1を用いたラジオレセプターアッセイをマウス視床下部膜画分及びMNB細胞膜画分を用いて実施した。その結果IC50はマウス視床下部膜画分、MNB細胞膜画分ともに約30nMで、Nesfatin-1特異的受容体は視床下部及びMNB細胞膜画分に存在することが分かった。さらにNesfatin-1投与群と非投与群のマウスの視床下部ならびに、Nesfatin-1添加群と非添加群のMNB細胞のトータルRNAを用いてDNAマイクロアレイを実施した。この結果、いくつかのG蛋白共役型受容体遺伝子発現の著明な変化が判明した。またMNB細胞膜画分とGST及びGST-Nesfatin-1融合蛋白を架橋した上で、SDS-PAGEに展開し、GST-Nesfatin-1に特異的なバンドを質量分析で解析し、やはりあるG蛋白共役型受容体蛋白を同定した。以上からNesfatin-1特異的受容体は視床下部及びMNB細胞膜画分に存在することが解明された。またNesfatin-1特異的受容体はG蛋白共役型受容体であることが強く示唆された。現在これらのDNAマイクロアレイで発現に著明な変化を見せたG蛋白共役型受容体遺伝子を解析中である。
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[Journal Article] Nesfatin-1-regulated oxytocinergic signaling in the paraventricular nucleus causes anorexia through a leptin-independent melanocortin pathway.2009
Author(s)
Maejima Y, Sedbazar U, Suyama S, Kohno D, Onaka T, Takano E, Yoshida N, Koike M, Uchiyama Y, Fujiwara K, Yashiro T, Horvath TL, Dietrich MO, Tanaka S, Dezaki K, Oh-IS, Hashimoto K, Shimizu H, Nakata M, Mori M, Yada T.
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Journal Title
Cell Metab. 10
Pages: 355-365
Peer Reviewed
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[Journal Article] Peripheral administration of nesfatin-1 reduces food intake in mice : the leptin-independent mechanism.2009
Author(s)
Shimizu H, Oh-IS, Hashimoto K, Nakata M, Yamamoto S, Yoshida N, Eguchi H, Kato I, Inoue K, Satoh T, Okada S, Yamada M, Yada T, Mori M.
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Journal Title
Endocrinology 150
Pages: 662-671
Peer Reviewed
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