2010 Fiscal Year Annual Research Report
摂食抑制ホルモンNesfatin-1の細胞内シグナル伝達経路の解明
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20591045
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
橋本 貢士 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (30396642)
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| Keywords | Nesfatin-1 / 受容体 / 遺伝子 / MC4R / G蛋白共役型受容体 / 摂食抑制 / DNAマイクロアレイ / CREB |
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| Research Abstract |
我々は昨年度までに、Nesfatin-1及びNesfatin-1の活性中心であるM30を添加するとマウス神経芽細胞腫由来の細胞(MNB)内のcAMP応答配列(CRE)binding protein(CREB)のリン酸化が増加しかつNesfatin-1特異的受容体はマウス視床下部及びMNB細胞膜画分に存在するという結果を得た。さらにNesfatin-1特異的受容体はG蛋白共役型受容体(GPCR)であることが示唆された。本年度はMNB細胞を用いたDNAマイクロアレイでGPCR遺伝子を解析し、選別したorphan GPCRの中からNesfatin-1受容体であるマウスGPCR-nesfatin-1(GPCRn)を同定した。GPCRn遺伝子を導入したCHO細胞株では、Nesfatin-1用量依存性に細胞内cAMPの増加が認められた。またβ arrestin assayではNesfatin-1とGPCRnに特異的結合が認められた。さらに遺伝子相同組み替え法を用いてGPCRnノックアウト(KO)マウスを作製した。GPCRnKOマウスの視床下部の細胞膜画分を用いたラジオレセプターアッセイでは、野生型マウスと比較してGPCRnKOマウスではNesfatin-1の視床下部細胞膜への結合が著明に減弱することが判明した。またMNB細胞を使って細胞内シグナル伝達を検討したが、MNB細胞にMC4RのSmall interfering RNAを導入し同遺伝子をノックダウンするもしくは、MNB細胞をMC4Rの特異的アンタゴニストであるSHU9119で前処理するとNesfatin-1及びM30による細胞内CREBのリン酸化は消失した。Nesfatin-1の細胞内シグナル伝達機構にMC4R自体及びMC4Rを介したシグナル伝達経路が不可欠であることが判明した。
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[Journal Article] Troglitazone, a ligand of peroxisome proliferator-activated receptor-γ, stabilizes NUCB2 (Nesfatin) mRNA by activating the ERK1/2 pathway : isolation and characterization of the human NUCB2 gene.2010
Author(s)
Yamada M, Horiguchi K, Urnezawa R, Hashimoto K, Satoh T, Ozawa A, Shibusawa N, Monden T, Okada S, Shimizu H, Mori M.
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Journal Title
Endocrinology.
Volume: 151
Pages: 2494-2503
Peer Reviewed
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[Journal Article] Fasting concentrations of nesfatin-1 are negatively correlated with body mass index in non-obese males.2010
Author(s)
Tsuchiya T, Shimizu H, Yamada M, Osaki A, Oh-I S, Ariyama Y, Takahashi H, Okada S, Hashimoto K, Satoh T, Kojima M, Mori M.
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Journal Title
Clin Endocrinol (Oxf).
Volume: 73
Pages: 484-490
Peer Reviewed
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