2009 Fiscal Year Annual Research Report
1型糖尿病の新規自己抗原を用いた発症・進展予知法の開発
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20591064
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
川崎 英二 Nagasaki University, 病院, 准教授 (70336171)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
阿比留 教生 長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (00380981)
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| Keywords | 1型糖尿病 / 自己抗体 / 自己抗原 / 亜鉛 / 一塩基多型 / 劇症1型糖尿病 / ラジオイッムノアッセイ / 診断 |
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| Research Abstract |
1. 抗ZnT8抗体のインスリン依存状態予知に関する検討:
(1) 前年度に確立したZnT8抗体測定系(Radioligand binding法)を用いて、緩徐進行1型糖尿病におけるインスリン依存状態予知に関する検討を行った。
(2) In vitro transcription/translation法により^<35>S標識ZnT8(268-369)蛋白を作成し、RIA法にてGAD抗体陽性NIDDM約50例の血清との反応性を検討した。
(3) ZnT8抗体陽性と追跡調査中のインスリン使用開始との関連を解析した。
(4) GAD抗体陽性NIDDMにおけるZnT8抗体の陽性率は19%であり、38%はインスリン自己抗体(IAA)、IA-2抗体、ZnT8抗体のいずれか1抗体以上を有していた。
(5) 追跡調査中36%のGAD抗体陽性NIDDMで血糖コントロールのためにインスリン治療が必要になり、その予知因子として、(1)高GAD抗体価、(2)GAD65中央部分に対するGAD抗体エピトープの存在、(3)IAA、IA-2抗体、ZnT8抗体の重複陽性の3つが同定された。
2. ZnT8/ZnT3キメラ蛋白の作成と抗ZnT8エピトープの解析:
(1) 立体構造を保持するためにZnT8と相同性が高いがZnT8抗体に認識されないZnT3とのキメラ蛋白を、ZnT3の細胞内部分およびZnT8の細胞内部分のcDNAを用いて作成した。
(2) 得られたZnT8/ZnT3キメラcDNAのシークエンス配列および蛋白発現を、直接シークエンス法、in vitro transcription/translation法により確認した。
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