2009 Fiscal Year Annual Research Report
2光子励起法を用いた下垂体前葉ホルモン開口分泌の可視化と解析
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20591088
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
高野 幸路 The University of Tokyo, 医学部附属病院, 特任講師 (20236243)
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| Keywords | 開口分泌 / 2光子励起法 / 下垂体細胞 / ホルモン分泌 / 機能性内分泌腫瘍 |
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| Research Abstract |
器官培養標本の安定化下垂体前葉細胞集塊を用いた実験系でプロラクチン分泌の解析を行い、新規の知見を得たが、そのさいに標本ごとの自発性分泌にばらつきが大きいことが明らかになった。未処理の標本で結果にばらつきがあると、薬理実験等の結果の評価がしずらくなるため、スライス標本と器官培養標本の系の確立とその評価を行った。急性スライス標本のでもばらつきが認められたため、スライスを一定時間培養し器官培養標本を作製した。その結果、プロラクチン分泌については自発分泌の頻度は増加し系の優位性は明らかになった。この系は、条件が整った場合は極めて有用な系であることが明らかになったため、手法として報告することとした。一方、標本ごとのばらつきは却って増したため、薬理実験を行うには不適切と判断した。薬理実験を行う目的では細胞集塊での実験系を安定化することに専念し、ある程度成功できた。プロラクチン分泌の解析のための薬理実験を行い、開口分泌の刺激伝達系路と分泌のモード変化の解析できた。GHRH,CRH,GnRHによる分泌刺激実験を行い、開口分泌の増加を観察した。GHRHの場合、下垂体前葉に占めるGH細胞の割合が多いためその後の解析が容易であるが、ACTH細胞、LH FSH細胞などは観察可能な場合が少なく、これらの細胞を2光子励起像で(染色することなしに)同定する方法の確立が必要であることが判明した。GHRH刺激による開口分泌の機構を解析した。
ヒト機能性腺腫の解析
ヒト機能性下垂体腺腫のホルモン過剰分泌の機構を明らかにする目的で、機能性腺腫の開口分泌を解析した。プロラクチン産生腺腫において自発開白分泌が存在することを明らかにした。自発開口分泌の生じる細胞内機構の一部を明らかにできた。
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Research Products
(9 results)
