2009 Fiscal Year Annual Research Report
新規血小板機能抑制分子セマフォリン3Aの抑制機構および抗血栓作用に関する検討
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20591151
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
柏木 浩和 Osaka University, 医学系研究科, 助教 (10432535)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
冨山 佳昭 大阪大学, 医学部附属病院, 講師 (80252667)
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| Keywords | 血小板 / セマフォリン / シグナル伝達 / 血栓 / 動脈硬化 |
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| Research Abstract |
1. Sema3Aの血小板機能抑制メカニズムに関する検討
Sema3Aは広範な血小板抑制を示すが、そのメカニズムはG蛋白共有型受容体を刺激するトロンビンやGPVI受容体を刺激するconvulxinによる活性化シグナルにおいては、細胞内カルシウム濃度の変化やPKCの活性化に影響を与えなかったことからPLC系には影響を与えず、一方、AKTのリン酸化およびRap1の活性化は著明に抑制されたことから、PI3 kinase系を抑制していると思われた。このことは、PI3kinassの下流に存在するGSK3βのリン酸化に対する検討においても確認された。一方、ADP刺激においては、PI3kinase阻害剤であるWortmanninやLY294002においてはAKTおよびRap1活性化ともに阻害されるのに対し、Sema3AではAKT活性化を阻害するのに対し、Rap1活性化は阻害されなかった。ADPによるRap1活性化には血小板上の2種類のADP受容体P2Y1およびP2Y12が関与しており、それぞれの特異的な阻害剤を加えた条件でSema3Aの影響を検討したところ、よりPI3kinase特異的であると考えられるP2Y1阻害剤を加えた条件下ではRap1活性化の抑制効果がみられた。このことから、ADP刺激においても、Sema3AはPI3kinase系の抑制に関与している可能性が考えられた。更に、血小板の活性化には、活性化を惹起するシグナルと維持するシグナルが存在しており、これらを血小板インテグリンαIIbβ3活性化を認識するPAC1抗体を用いて区別する実験系を我々は確立したが(Shiraga M, et al, Blood 108, 1509, 2006 (abst))、これを用いて、Sema3Aの血小板機能抑制シグナルを検討したところ、トロンビン刺激において、Sema3Aは活性化惹起シグナルと維持シグナルともに抑制する可能性が示された。
2. Sema3Aの血栓形成および動脈硬化におよぼす影響に関する検討
Sema3A発現ベクターの改良を続けることにより、血栓モデルに対する基礎的な検討を行った。ウイルスベクターの濃縮方法を改善することにより、培養細胞においては発現が改善される可能性が示された。また、アディポネクチン・ノックアウト・マウス(Adiponectin KO mice)を用いて血栓モデル手技の改善を行った。
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[Journal Article]2009
Author(s)
冨山佳昭
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Journal Title
血小板活性化と動脈硬化. Annual Review 血液2009年版(中外医学社)
Pages: 193-198
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[Journal Article]2009
Author(s)
冨山佳昭
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Journal Title
難治性ITPに対する新規治療法は? EBM血液疾患の治療2010-2011(中外医学社)
Pages: 434-438
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[Journal Article]2009
Author(s)
冨山佳昭
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Journal Title
アレルギー性紫斑病. 血液疾患診療ハンドブック-診療の手引きと臨床データ集-(医薬ジャーナル社)
Pages: 638-642
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[Journal Article]2009
Author(s)
冨山佳昭, 等
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Journal Title
血小板をめぐる最新の話題. 新しい診断と治療のABC 血小板減少症・増加症(最新医学社)
Pages: 222-228
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