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2008 Fiscal Year Annual Research Report

β3インテグリンの機能調節に関わる分子のクローニングおよびその解析

Research Project

Project/Area Number 20591162
Research InstitutionNational Cardiovascular Center Research Institute

Principal Investigator

本田 繁則  National Cardiovascular Center Research Institute, 病因部, 室長 (00303959)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 冨山 佳昭  大阪大学医学部附属病院, 輸血部, 部長 (80252667)
Keywordsβ3インテグリン / シグナル伝達 / ILK / クローニング
Research Abstract

ILK機能ドメインのインテグリン活性化に関する解析
我々はこれまでILKがインテグリンの活性化シグナル伝達に重要であることを明らかにした。今回、ILKの各機能ドメインのインテグリン活性化における役割について解析した。ILKのドメインセグメントであるアンキリンリピートドメイン、アンキリンリピート/pleckstrin homologyドメイン、キナーゼドメインをGFP融合タンパクとして発現させるプラスミドベクターを作製し、ILKが欠損した変異細胞にトランスフェクションした。完全長のGFP融合ILKは非活性状態のインテグリンを有意に活性化した。一方、ILKの各ドメインセグメントはいずれもそのタンパクの発現を確認できたが、インテグリンの活性化を誘導しなかった。したがって、インテグリンの活性化にはILKの全長が必要と考えられた。また、キナーゼ活性に障害のあるミュータントILKを2種類作製し、ILK欠損細胞に導入した。その結果、いずれのミュータントも中程度ではあるがインテグリンの活性化を誘導した。これにより、本細胞のインテグリンの活性化にはILKのキナーゼ活性は必須でないことが示唆された。
β3インテグリンの機能発現に関わる分子のクローニング
ILKが再びクローニングされることを防ぐために、変異導入に用いた活性化インテグリンを発現する親株細胞にILKをトランスフェクションし、ILKを過剰に発現する細胞株を得た。

  • Research Products

    (3 results)

All 2009 2008

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Integrin-linked kinase associated with integrin activation2009

    • Author(s)
      S. HONDA
    • Journal Title

      Blood (in press)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Prevalence of genetic mutations in protein S, protein C and antithrombin genes in Japanese patients with deep vein thrombosis2009

    • Author(s)
      T. Miyata
    • Journal Title

      Thromb Res 124

      Pages: 14-18

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 発現クローニングによるインテグリン機能発現分子の同定2008

    • Author(s)
      本田繁則
    • Organizer
      第31回日本血栓止血学会学術集会SPCシンポジウム
    • Place of Presentation
      大阪国際交流センター
    • Year and Date
      20081120-20081122

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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