2008 Fiscal Year Annual Research Report
新規抗体を用いたマウスIL-25レセプター発現細胞の同定・純化
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20591187
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
有信 洋二郎 Kyushu University, 大学病院, 臨床助教 (90467928)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
赤司 浩一 九州大学, 医学研究院, 教授 (80380385)
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| Keywords | IL-25 レセプター / 骨髄球系前駆細胞 / 好塩基球前駆細胞 |
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| Research Abstract |
1.平成20年度研究では、まずマウスIL-25レセプター細胞外ドメインを免疫源とした新たなラットモノクローナル抗体の作成・精製を行った。Mouse IL-25R及びHuman IL-25Rを強制発現したBa/F3細胞を用いて、フローサイトメトリー解析を行い、両者に反応する高親和性クローンを選別し、大量精製を行った。同抗体が、免疫染色にても使用可能であることも確認した。
2.この新規マウスIL-25レセプター抗体を用い、マウス造血幹細胞、骨髄球系前駆細胞、好塩基球前駆細胞(BaP)におけるIL-25レセプターの発現レベルを解析した。PCRでは、骨髄球形共通前駆細胞(CMP)、顆粒球単球系前駆細胞(GMP)、BaPにIL-25RmRNAの発現を認めたが、フローサイトメトリー解析では、GMPにのみ、この発現を認めた。分化ステージ特異的にこのレセプターの発現は制御されていることがわかった。
3.現在、GMPを、セルソーターを用いてIL-25R陽性及び陰性分画に分離し、in vitro cultureの系で解析中である。更に、同様の解析をヒト検体を用いて行う予定である。
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