2009 Fiscal Year Annual Research Report
先天性甲状腺機能機能低下症の分子遺伝学的発機序および病態生理の解明
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20591232
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
長谷川 奉延 Keio University, 医学部, 准教授 (20189533)
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| Keywords | 小児内分泌学 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は以下の3点である。
(1)単一遺伝子病による遺伝性CHの頻度を明らかにする。(2)多因子遺伝病、すなわち複数の遺伝子の相互作用(例えばdigenic変異;異なる2つの遺伝子の同時変異による発症)による遺伝性CHの存在の有無を明らかにする。および(3)変異が証明された各遺伝子において変異遺伝子の機能をin vitroで解明する。
平成21年度には以下の成果を得た。
(1)転写因子の異常による単一遺伝子病としての遺伝性CHの頻度を明らかにした。すなわち、(1)本邦におけるヘテロ接合性PAX8変異の有病率はCHの2.0%、一般人口の1/176,000である。(2)本邦におけるPAX8変異以外の転写因子(TTF-1,TTF-2,NKX2-5)の異常による単一遺伝子病としての遺伝性CHは稀である(いずれも現時点では存在を証明できていない)。
(2)変異の可能性のあるTTF-1遺伝子の機能をin vitroで解析する系を確立した。すなわち、TTF-1結合領域を有するサイログロブリンプロモーターを用いたルシフェラーゼアッセイである。この系を用いて、H60W TTF-1は変異ではなく、稀なシークエンスバリエーションであることを証明した。
(3)変異の可能性のあるPAX8遺伝子の機能をin vitroで解析する系を確立した。すなわち、GFP-PAX8融合遺伝子を用いたPAX8蛋白の細胞内局在アッセイ、PAX8結合DNA配列を用いたゲルシフトアッセイ、PAX8結合領域を有するサイログロブリンプロモーターを用いたルシフェラーゼアッセイ、である。これらの系によりPAX8c.238_252dupを解析した結果、変異PAX8は核内に移行するものの、DAN結合能および転写活性化能を欠如することを証明した。
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