2010 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗原ヒト化マウスを用いた後天性表皮水疱症モデルの作成と新規治療法開発への応用

Research Project

Project/Area Number	20591312
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	芝木晃彦北海道大学, 大学院・医学研究科, 非常勤講師 (40291231)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	秋山真志名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (60222551) 伊藤圭北海道大学, 大学院・医学研究科, 非常勤講師 (20421977)
Keywords	皮膚病理学 / 免疫 / 治療 / 臨床 / 細胞・組織 / 自己免疫性疾患 / 動物モデル / リンパ球
Research Abstract	VII型コラーゲン(COL7)はアンカーリングフィブリルの構成蛋白で,表皮と真皮との接着に重要な基底膜構成蛋白である。COL7に対する自己抗体により自己免疫性疾患である後天性表皮水庖症(EBA)が発症すると考えられているが、発症病理メカニズムについての詳細な検討は未だなされていない。本研究の目的は、in vivoの系においてヒトCOL7に対するIgG抗体を産生するEBAモデルマウスを作成し、新たな治療法の開発を行うことである。前年度までの研究において、C57BL/6マウスにリコンビナントヒトCOL7をアジュヴァントとともに免疫したところ、免疫の約3週後から高力価の抗ヒトCOL7IgG抗体の産生がみられた。そこで、COL7ヒト化新生児マウスにリコンビナントヒトCOL7で免疫したマウスのIgG抗体を腹腔内投与したところ、皮膚基底膜にIgG抗基底膜抗体の線状沈着が認められたが、明らかなフェノタイプの発現はみられなかった。また、抗ヒトCOL7抗体産生を誘発したマウスより脾細胞を調整し、ヒトCOL7を発現するマウスへ移植したがドナー細胞の良好な生着をえられず、フェノタイプの発現はみられなかった。この問題を克服するため、免疫不全マウスであるRAG2ノックアウトマウスと交配したCOL7ヒト化免疫不全マウスを作成し、抗ヒトCOL7抗体産生を誘発したC57BL/6マウスより脾細胞移植を行ったが、抗ヒトCOL7抗体の産生や皮疹および蛍光抗体法による皮膚へのIgGの沈着は観察できなかった。以上より、移植した脾細胞はCOL7ヒト化免疫不全マウスに生着できなかったと考えた。