2009 Fiscal Year Annual Research Report
肺癌浸潤B細胞が認識する腫瘍抗原の抗体療法への応用
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20591680
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| Research Institution | University of Occupational and Environmental Health, Japan |
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Principal Investigator |
水上 真紀子 University of Occupational and Environmental Health, Japan, 医学部, 助教 (10441859)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安元 公正 産業医科大学, 医学部, 教授 (30150452)
花桐 武志 産業医科大学, 医学部, 准教授 (30299614)
重松 義紀 産業医科大学, 医学部, 助教 (10546469)
川原 浩治 北九州工業高等専門学校, 細胞工学センター, 教授 (20321515)
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| Keywords | 抗体療法 / 肺癌 / 腫瘍抗原 / 腫瘍浸潤B細胞 / モノクローナル抗体 |
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| Research Abstract |
本研究は、肺癌腫瘍内浸潤B細胞に認識され肺癌細胞に高発現する細胞表面蛋白であるUOEH-LC-1に対する特異的抗体療法を構築することを目的としている。当該年度においては、UOEH-LC-1蛋白を組み換えタンパク質として大量に作製・精製し、マウスに免疫することによりUOEH-LC-1蛋白に対する臨床応用可能なモノクローナル抗体を得ることを目標とした。
研究初年度はIgM抗体しか得ることができなかったため、本年度は、モノクローナルIgG抗体を得ることを目標とした。これまでは、免疫するUOEH-LC-1蛋白量が足りなかったためIgG抗体へのクラススイッチがうまく起きなかった可能性が考えられた。今回、抗体を産生するB細胞の誘導において、UOEH-LC-1蛋白を増量(1回あたり10μg)してマウスに免疫した。その結果、マウス血清中に抗体産生を認めたため、犠牲死させミエローマ細胞と融合を行った。得られたハイブリドーマに対して、限界希釈を施行することで2株のハイブリドーマクローンを樹立した。スクリーニングの結果、1クローンのIgG抗体産生株を得た(7B6E)。このモノクローナルIgG抗体は、サブクラスIgG1であり、UOEH-LC-1蛋白を認識することをELISA法にて確認した。さらに現在、FACSおよび免疫組織化学染色により抗体のUOEH-LC-1蛋白に対する特異性の評価を行っている。今後、このモノクローナルIgG抗体のin vitroにおける抗腫瘍効果の評価、および動物治療モデルを作成し、in vivoでの治療効果の有無を検討する。
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