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2008 Fiscal Year Annual Research Report

悪性グリオーマにおけるWntシグナル活性化の検討と診断・治療への応用

Research Project

Project/Area Number 20591716
Research InstitutionKagoshima University

Principal Investigator

平野 宏文  Kagoshima University, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (00264416)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 岸田 昭世  鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (50274064)
有田 和徳  鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (90212646)
湯之上 俊二  鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 助教 (20404478)
KeywordsWntシグナル / Wnt5A / Wnt11 / グリオーマ
Research Abstract

悪性グリオーマにおいて, Wntシグナルの発現がいかなる状態であるか,まずは,網羅的にその状況を把握するため,ヒトグリオーマから培養系に移した腫瘍細胞G8M(悪性上衣腫), G5M(膠芽腫), G17N(膠芽腫)を用いて各Wntの発現を調べた.
Wnt1, Wnt2, Wnt2B, Wnt3, Wnt3A, Wnt4, Wnt5A, Wnt5B-2, Wnt6, Wnt7A, Wnt7B, Wnt8A, Wnt8B, Wnt9A, Wnt9B, Wnt10A, Wnt10B, Wnt11のプライマーを準備し,各Wntの発現を定量PCRで調べた.その結果,mRNAのコピー数比として,三種類の細胞ともWnt5Aが最も多く,全体の50%以上を占めていた.その他, Wnt11, Wnt5B, Wnt7A, Wnt7B, Wnt2Bが認められた.
一方,抗体による組織標本の検索では, Wnt2, Wnt2B, Wnt4, Wnt5A, Wnt6, Wnt7A, Wnt10Aを用いた免疫染色を膠芽腫組織を中心に行った.その結果, Wnt2, Wnt2B, Wnt5A, Wnt6, Wnt10Aが手術摘出グリオーマに確認できた.
現在までにWnt11が膠芽腫を中心とした悪性グリオーマに発現していることが示唆されたので,その発現が,細胞浸潤,細胞移動にどのような働きを持つか,検討した.細胞株としてU251を使用し,Wntllの抑制手段としてsiRNAを用い,スクラッチアッセイを行った.その結果, Wnt11の発現を抑制すると,腫瘍細胞の細胞移動が低下することが確認された.

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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