2008 Fiscal Year Annual Research Report
KIT陽性間質細胞情報伝達機構の解明と過活動膀胱に対する新規分子標的治療の開発
| Project/Area Number |
20591886
|
|---|
| Research Institution | Nagoya City University |
|---|
Principal Investigator |
佐々木 昌一 Nagoya City University, 大学院・医学研究科, 講師 (50225869)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
窪田 泰江 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教 (00381830)
小島 祥敬 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (60305539)
岡田 真介 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 研究員 (40381818)
早瀬 麻沙 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 研究員 (60468254)
郡 健二郎 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (30122047)
|
|---|
| Keywords | KIT陽性間質細胞 / 細胞増殖 / KIT陽性間質細胞 / Glivec / Bcr-Ab1 / マウス |
|---|
| Research Abstract |
(1)FACSによるKIT陽性間質細胞の分離培養
マウス膀胱を摘出し、膀胱筋層と粘膜層+粘膜下層を分離。粘膜層+粘膜下層を用いる。蛍光色素をFITC、モノクローナル抗体としてc-kit、vimentin、connexin43抗体を用い、ハイパフォーマーセルソーターにてセルソーティングを行い、KIT陽性間質細胞を分離し培養することができた。これを免疫組織化学染色(c-kit、vimentin、connexin43抗体)たところ、分離純度は約70%であった。
(2)KIT陽性間質培養細胞の刺激とKIT陽性細胞の細胞シグナル伝達系の変化
(A)SCFおよびGlivecによるKIT陽性間質細胞の刺激と細胞シグナル伝達系の変化
上記の方法で分離したKIT陽性間質培養細胞を用い、KITのligandであるStem cell factorを投与し、KIT陽性間質細胞の細胞増殖能をMTTassayにより行ったところ、細胞増殖が確認された。またKITシグナル伝達系Bcr-Ab1の発現の変化について定量的RT-PCRを行ったところ、Bcr-Ab1の発現は有意に増加していた。
KIT陽性間質細胞はGlivecを投与することによって増殖能が強く抑制された。
以上の結果から、マウス膀胱におけるKIT陽性間質培養細胞は細胞増殖に関与していると考えられた。
|
-
-
-
-
-
-
[Presentation] 卵巣摘除ラットの排尿状態におけるisoflavone投与の影響2008
Author(s)
岡田真介, 小島祥敬, 濱川隆, 伊藤尊一郎, 柴田泰宏, 井村誠, 早瀬麻沙, 濱本周造, 水野健太郎, 窪田泰江, 佐々木昌一, 津ヶ谷正行, 郡健二郎
Organizer
第58回日本泌尿器科学会中部総会
Place of Presentation
大津市
Year and Date
2008-11-15
-
-
-
-
-
-
