MSI陽性子宮体癌におけるフレームシフト変異タンパクの検出と免疫療法への応用

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20591960
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 岩田 卓 Keio University, 医学部, 助教 (30296652)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤田 知信 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (20199334)
• Keywords: 子宮体癌 / MSI / 免疫応答 / 変異タンパク / 免疫療法

Research Abstract

1.臨床検体の収集と臨床像の解析
文書による同意を得た子宮体癌患者より、癌組織と血清を採取した。これまでで合計60例の検体を保管し、研究の遂行に用いる。
2.子宮体癌の遺伝子解析によるMSIの検索
採取した検体でMSI検索を行う。MSIマーカーとしてD2S123、D5S346、D17S250、BAT26、BAT25、MSH3,、MSH6、TGFβRII,、PTEN、BAX、MBD4A10、MBD4A6の12種を用い、シークエンスによって変異を検出し、4個以上の遺伝子で変異を認めた場合、MSI陽性(MSI-H)とした。
3.患者血清中の変異ペプチドに対する抗体の検出
1)子宮体癌組織を用いてTGFβRII,、PTEN、BAX、hMLH1、hMSH6、CDX2のシークエンスを行い、それぞれの遺伝子でフレームシフトが生じているか、生じている場合はどのフレームなのかを解析した。
2)TGFβRII,、PTEN、BAX、hMLH1、hMSH6、CDX2の変異部分のペプチドを合成し、変異ペプチドと患者血清を用いたELISA法によって、患者血清中の特異抗体の検出をそれぞれのペプチドで行った。
現在のところ、抗体を検出したのはTGFβRIIで1例、PTENで2例と少数であった。また、3-1)で行ったシークエンスの結果とも一致しなかった。したがって、今後、抗体検出のターゲットタンパクを広げてスクリーニングを行うこととする。具体的には、我々が蓄積したSEREXのデータをもとに、抗体保有率の高い抗原を選択し、リコンビナントタンパクを作成し、抗体保有のスクリーニングを行う.