2009 Fiscal Year Annual Research Report
歯周病関連細菌の表層蛋白質の糖鎖修飾と病原性との関連性
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20592165
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| Research Institution | Aichi Gakuin University |
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Principal Investigator |
村上 幸孝 Aichi Gakuin University, 歯学部, 准教授 (60239506)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉村 文信 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (50001962)
長谷川 義明 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (70460524)
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| Keywords | 歯周病関連細菌 / 表層蛋白質 / 糖鎖修飾 / 病原性 / レクチン / Pgm6 / 7 |
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| Research Abstract |
多くの蛋白質は翻訳後修飾を受けて多様化すると言われている。翻訳後修飾で最も多いのは糖鎖修飾で、その意義として、付着への関与、蛋白質分解からの保護、抗原の変異性の付与や免疫機能からの回避などが挙げられる。ところが、歯周病関連細菌においては、糖蛋白質はほとんど研究されていない。本研究では、歯周病関連細菌のうちPorphyromonas gingivalisの表層蛋白質の糖鎖修飾に注目し、病原性との関連性を明らかにしたいと考えている。
P.gingivalisの全菌体抽出液を調製し、種々のレクチンアフィニティーカラムを用いて糖蛋白質の分離を試みたところ、WGAカラムにより効率的に糖蛋白質が濃縮できることが分かった。質量分析により同定を行った結果、OmpA様蛋白質に属する主要外膜蛋白質Pgm6/7が主に含まれていた。
p.gingivalisの主要外膜蛋白質Pgm6/7の性質の一端を明らかにするために、菌体表層に存在する短線毛との関わりを検討した。ところが、この線毛を構成するMfalおよびMfa2蛋白質との物理的な分子の接触は認められなかった。
また,p.gingivalisの菌体成分を二次元電気泳動によって展開し、糖鎖特異的染色を行った後、網羅的に糖修飾蛋白質スポットを解析した。その結果、主要外膜蛋白質Pgm6/7のほかに少なくとも数種類の糖蛋白質の存在が明らかになった。現在、変異株を作製して、これらの糖蛋白質の性質を調べているところである。
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