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2010 Fiscal Year Annual Research Report

歯周病関連細菌の表層蛋白質の糖鎖修飾と病原性との関連性

Research Project

Project/Area Number 20592165
Research InstitutionAichi Gakuin University

Principal Investigator

村上 幸孝  朝日大学, 歯学部, 教授 (60239506)

Keywords歯周病関連細菌 / 表層蛋白質 / 糖鎖修飾 / 病原性 / レクチン / Pgm6/7 / 細胞外マトリックス分子 / 共凝集
Research Abstract

多くの蛋白質は翻訳後修飾を受けて多様化すると言われている。翻訳後修飾で最も多いのは糖鎖修飾で、その意義として、付着への関与、蛋白質分解からの保護、抗原の変異性の付与や免疫機能からの回避などが挙げられる。ところが、歯周病関連細菌においては、糖蛋白質はほとんど研究されていない。本研究では、歯周病関連細菌のうちPorphyromonas gingivalisの表層蛋白質の糖鎖修飾に注目し、病原性との関連性を明らかにしたいと考えている。
P. gingivalisの全菌体抽出液を調製し、種々のレクチンアフィニティーカラムを用いて糖蛋白質の分離を試みたところ、WGAカラムにより効率的に糖蛋白質が濃縮できることが分かった。質量分析により同定を行った結果、OmpA様蛋白質に属する主要外膜蛋白質Pgm6/7が主に含まれていた。
P. gingivalisの主要外膜蛋白質Pgm6/7の性質の一端を明らかにするために、親株およびOmpA変異株から、ヘテロ三量体のPgm6/7とホモ三量体のPgm6およびPgm7をWGAカラムを用いて分離・精製した。細胞外マトリックス分子との結合性を調べると、Pgm6/7はフィブロネクチンやラミニンに強く結合したが、Pgm6およびPgm7では結合能が顕著に低下していた。OmpA様蛋白質のヘテロ三量体構造が機能の発揮に重要であると考えられた。
また,P. gingivalisの菌体成分を二次元電気泳動によって展開し、糖鎖特異的染色を行った後、網羅的に糖修飾蛋白質スポットを解析した。その結果、主要外膜蛋白質Pgm6/7のほかに3種類の糖蛋白質が同定できた。これらの糖蛋白質の変異株を作製して、親株と比較したところ、自己凝集能、バイオフィルム形成能および酸化ストレス抵抗性が有意に低下していた。そのため、P. gingivalisの定着や生存に関与することが示唆された。

  • Research Products

    (4 results)

All 2011 2010

All Journal Article (1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Porphyromonas gingivalisの糖蛋白質の同定とそれらの欠失による自己凝集能の検討2010

    • Author(s)
      岸美和子, 他
    • Journal Title

      Bacterial Adherence & Biofilm

      Volume: 24巻(印刷中)

  • [Presentation] 歯周病関連細菌Porphyromonas gingivalisの菌体に存在するOmpA様糖蛋白質の分離と細胞外マトリックス分子との結合性2011

    • Author(s)
      村上幸孝,引頭毅,長谷川義明,猪俣恵
    • Organizer
      第40回東海乳酸菌研究会研究報告会
    • Place of Presentation
      中日パレス(名古屋市)
    • Year and Date
      2011-02-05
  • [Presentation] Porphyromonas gingivalisの糖蛋白質の同定-欠失株を用いたバイオフィルム形成能および酸化ストレス抵抗性の検討-2010

    • Author(s)
      岸美和子,長谷川義明,村上幸孝,中村洋,吉村文信
    • Organizer
      愛知学院大学歯学会第77回学術大会
    • Place of Presentation
      愛知学院大学(名古屋市)
    • Year and Date
      2010-12-05
  • [Presentation] 歯周病関連細菌Porphyromonas gingivalisのOmpA様糖蛋白質と菌体外マトリックス分子との結合性2010

    • Author(s)
      村上幸孝,吉村文信
    • Organizer
      第52回歯科基礎医学会学術大会
    • Place of Presentation
      タワーホール船堀(東京都)
    • Year and Date
      2010-09-22

URL: 

Published: 2012-07-19  

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