新規リン酸化酵素の骨格筋疾患における病態生理学的意義の研究

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20599016
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 中川 修 Nara Medical University, 医学部, 教授 (40283593)
• Keywords: 骨格筋疾患 / リン酸化酵素

Research Abstract

私達は、骨格筋特異的転写因子Mef2cの下流遺伝子として心筋・骨格筋特異的発現調節を受ける新規のリン酸化酵素遺伝子Srpk3を同定した。Srpk3 KOマウスは骨格筋の成長障害と残存中心核を特徴とする組織学的異常を示し、Srpk3の筋肉における重要性が示唆された。今回の研究では、Srpk3の骨格筋における機能メカニズム、特に骨格筋における基質を明らかにすること、Srpk3のRNA splicingにおける意義を生体レベルで検証すること、さらにヒト疾患におけるSRPK3の病態生理学的意義を解析することを目的としている。
私達はSrpk3 KOマウスと正常マウスの骨格筋RNAを用いてmRNA splicing microarray chipによる解析を行った。KOマウスにおいて増加・減少するmRNA splicing isoformが多数認められたが、これらのスプライシング異常候補遺伝子のうち骨格筋機能に関連が考えられるものについて個別の解析を進める必要がある。また、Srpk3 KO・Srpk3骨格筋過剰発現トランスジェニック(Tg)・正常マウスの骨格筋を用いた2D-DIGEによるSrpk3基質同定実験を開始し、新しいSrpk3基質候補を得た。今後、これらの候補について、その骨格筋機能における意義について検討してゆく。これまでのところ、既知のSrpk基質を用いた生化学実験においては、ヒトcentronuclear myopathy 2症例において認められたSRPK3アミノ酸置換による酵素活性の変化は認めなかったが、今後新しい基質候補が同定できた場合には、さらに解析を試みる計画である。