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2009 Fiscal Year Annual Research Report

動原体の核内配置機構とその役割の解明

Research Project

Project/Area Number 20657002
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

五島 剛太  Nagoya University, 高等研究院, 特任准教授 (20447840)

Keywords細胞、組織
Research Abstract

本研究では、RNAi、自動顕微鏡撮影、自動画像解析、コンピュータシミュレーションを組み合わせ、培養細胞で動原体が核内中央付近に配置する分子機構を明らかにし、さらにその配置の意義を、特に分裂期における微小管との結合効率といった観点から追究することを計画した。前年度までの細胞生物学的実験およびシミュレーションにより、ショウジョウバエ培養細胞において動原体が核中央付近にクラスター化していることを見出したが、このクラスター化の度合いと分裂期における微小管との結合効率に正の相関は認められなかった。平成21年度は、本計画のもうひとつの目標である自動画像解析と顕微鏡観察の自動化について研究を進めた。我々は、地元ガラス会社等の協力を得て、敷居を取り除いて96細胞サンプルを貼付けることのできる巨大なプレパラートを作成した。このプレパラートを用いると、対物レンズがサンプル間を移動する際に自動焦点装置が作用し続けることができ、複数サンプルの自動イメージングが可能となった(通常の96穴プレートでは、サンプル間にあるプラスチックの敷居が自動焦点装置の作用を中断させてしまう)。本システムを用いて、ショウジョウバエS2細胞の12サンプルについて、スピニングディスク型共焦点顕微鏡、100倍油浸レンズを用いて300の2色画像をわずか15分でイメージングすることに成功した。また、顕微鏡で撮影した核シグナルを目動認識しシグナル強度を測定するコシピュタープログラムも作製した。以上の成果は、自前の顕微鏡を用いた自動イメージング、自動画像解析を可能とするテクノロジーの基盤となる。

  • Research Products

    (10 results)

All 2010 2009 Other

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (5 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] New look inside the spindle : microtubule-dependent microtubule generation within the spindle.2010

    • Author(s)
      Goshima G, Kimura A.
    • Journal Title

      Curr Opin Cell Biol 22(1)

      Pages: 44-49

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The augmin complex plays a critical role in spindle microtubule generation for mitotic progression and cytokinesis in human cells.2009

    • Author(s)
      R Uehara, R Nozawa, A Tomioka, S Petry, RD Vale, C Obuse, G Goshima
    • Journal Title

      Proc Natl Acad Sci USA 106(17)

      Pages: 6998-7003

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article]2009

    • Author(s)
      Monica Bettencourt-Dias, Gohta Goshima
    • Journal Title

      Mitosis : Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology 545 Chapter3 : RNAi in Drosophila S2 Cells as a Tool for Studying Cell Cycle Progression(Humana Press)

      Pages: 39-62

  • [Journal Article]2009

    • Author(s)
      上原亮太・五島剛太
    • Journal Title

      蛋白質核酸酵素 2009年11月号 Vol. 54 No. 14(共立出版)

      Pages: 1850-5

  • [Presentation] A New Model Organism for Studying Microtubule Self-Organisation2009

    • Author(s)
      G.Goshima, Y.Nakaoka, M.Kubo, M.Hasebe, Y.Hiwatashi
    • Organizer
      THE AMERICAN SOCIETY FOR CELL BIOLOGY 49th Annua Meetings
    • Place of Presentation
      アメリカ、サンディアゴ
    • Year and Date
      2009-12-07
  • [Presentation] Augmin Is Required for De Novo Microtubule Generation during Central Spindle Formation2009

    • Author(s)
      R Uehara, G Goshima
    • Organizer
      THE AMERICAN SOCIETY FOR CELL BIOLOGY 49th Annua Meeting
    • Place of Presentation
      アメリカ、サンディアゴ
    • Year and Date
      2009-12-07
  • [Presentation] 細胞分裂期スピンドルの形成機構2009

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      生化学若い研究者の会
    • Place of Presentation
      京都府、京都市
    • Year and Date
      2009-11-28
  • [Presentation] Microtubule generation within the spindle2009

    • Author(s)
      Gohta Goshima
    • Organizer
      2009 FASEB Summer Research Conference
    • Place of Presentation
      イタリア、ルッカ
    • Year and Date
      2009-09-04
  • [Presentation] Genome-Wide RNAi Screen Identifies Genes Required for Mitotic Spindle Formation in Animal Cells2009

    • Author(s)
      Gohta Goshima
    • Organizer
      The Ninth NIBB-EMBL Symposium
    • Place of Presentation
      愛知県、岡崎市
    • Year and Date
      2009-04-21
  • [Remarks]

    • URL

      http://bunshi4.bio.nagoya-u.ac.jp/~tenure2/goshima.html

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Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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