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2008 Fiscal Year Annual Research Report

空間相互相関解析による細胞内情報伝達機構解明法の確立

Research Project

Project/Area Number 20657035
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

金城 政孝  Hokkaido University, 大学院・先端生命科学研究院, 教授 (70177971)

Keywords細胞生物学 / 細胞内情報伝達 / 相関解析 / 空間相関 / ゆらぎ / 生体膜 / 並進拡散 / 蛍光測定
Research Abstract

我々はこれまで全反射光学系を利用して多点蛍光相関分光装置を開発し細胞膜表面におけるタンパク質の動態を1分子レベルで検出し, タンパク質の拡散速度からタンパク質相互作用を解析を進めてきた。これまで細胞局所における生体膜の流動性の違いや, 膜タンパク質の拡散などを明らかにし, 生体膜表面に置けるタンパク質の動態解析に非常に有効であることを示してきた。この装置は単1細胞表面の7点同時測定であり, 十分ではないが細胞膜内の一定に範囲をカバーすることができ, 擬似的には2次元とみることができる。そこで各測定点のシグナル間の関連性を明らかにすることが可能であるなら, それがタンパク質の活性化と関連していることからシグナル同士の時間遅れから情報の早さを, また関連性の強弱から情報の流れの方向などを明らかにできる可能性があることに着目した。申請者はその方法として, これまで分子間相互作用解析に利用して'きた時間相互相関解析を, 測定点間の空間相互相関解析に利用して解析を行った。
本年は装置に生体膜上の多点での分子間相互作用を検出可能とするために相関装置を増設し、これまでの測定装置と合わせて, 合計8点の測定点を確保した。また検出部分にバンドル化した光ファイバーの設置と検出器の接続を行った。各点からシグナルが同時に測定可能かどうかの検討を行った結果, 十分なシグナル強度が得られたのを確認した。
次年度はそのシグナル間の相互相互作用が見られるかをモデル実験を通して確認する予定である。

  • Research Products

    (13 results)

All 2009 2008

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 8 results) Presentation (5 results)

  • [Journal Article] Multipoint fluorescence correlation spectroscopy with total internal reflection fluorescence microscope2009

    • Author(s)
      Ohsugi Y
    • Journal Title

      J Biomed Opt. 14(1)

      Pages: 014030-1-014030-4

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Fluorescence cross-correlation spectroscopy of plant proteins2009

    • Author(s)
      Muto H
    • Journal Title

      Methods Mol Biol. 479

      Pages: 203-213

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The A-and B-type nuclear lamin networks : microdomains involved in chromatin organization and transcription2008

    • Author(s)
      Shimi T
    • Journal Title

      Genes Dev. 24(22)

      Pages: 3409-3421

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cross-talk-free fluorescence cross-correlation spectroscopy by the switching method2008

    • Author(s)
      Takahashi Y
    • Journal Title

      Cell Struct Funct. 33(1)

      Pages: 143-150

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Reciprocal interaction with G-actin and tropomyosin is essenti al for aquaporin-2 trafficking2008

    • Author(s)
      Noda Y
    • Journal Title

      J Cell Biol. 182(3)

      Pages: 587-601

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] In vivo quantitative analysis of PKA subunit interaction and cAMP level by dual color fluorescence cross correlation spectra scopy2008

    • Author(s)
      Park H
    • Journal Title

      Mol Cells. 26(1)

      Pages: 87-92

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Stress-induced environmental changes in a single cell as revealed by fluorescence lifetime imaging2008

    • Author(s)
      Nakabayashi T
    • Journal Title

      Photochem Photobiol Sci. 7(6)

      Pages: 671-674

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Application of fluorescence lifetime imaging of enhanced green fluorescent protein to intracellular pH measurements2008

    • Author(s)
      Nakabayashi T
    • Journal Title

      Photochem Photobiol Sci. 7(6)

      Pages: 668-670

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 多点全反射蛍光相関装置による細胞測定2008

    • Author(s)
      金城政孝
    • Organizer
      第5回バイオオプティクス研究会
    • Place of Presentation
      浜松市
    • Year and Date
      2008-12-19
  • [Presentation] Study of Mombrane-Binding Protein Dynamics with Fluorescence Correlation Spectroscopy2008

    • Author(s)
      Masataka Kinjo
    • Organizer
      The Annual Meeting of the Spectroscopical Societv of Japan
    • Place of Presentation
      Sendai, JAPAN
    • Year and Date
      2008-11-20
  • [Presentation] Dybamic Aspects of Protein in Living Cell Investigated by Tota I Internal Reflection Fluourescence Correlation Spectroscopy2008

    • Author(s)
      Masataka Kinjo
    • Organizer
      International Congress on Cell Biology
    • Place of Presentation
      Seoul, KOREA
    • Year and Date
      2008-10-09
  • [Presentation] FCSとFCCS2008

    • Author(s)
      金城政孝
    • Organizer
      第4回ライブセルイメージング講習会
    • Place of Presentation
      つくば市
    • Year and Date
      2008-10-07
  • [Presentation] 蛍光相関分光法を用いた生命システムの解析2008

    • Author(s)
      金城政孝
    • Organizer
      日本物理学会2008年秋季大会
    • Place of Presentation
      盛岡市
    • Year and Date
      2008-09-22

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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