2010 Fiscal Year Annual Research Report
転写因子HIF2Aによる軟骨細胞の発生・分化の制御機構の解明
| Project/Area Number |
20689028
|
|---|
| Research Institution | The University of Tokyo |
|---|
Principal Investigator |
齋藤 琢 東京大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (30456107)
|
|---|
| Keywords | 再生医学 / 細胞・組織 / 発生・分化 |
|---|
| Research Abstract |
変形性関節症モデルを用いた軟骨変性に関するHIF2Aの機能を解析した。HIF2Aヘテロノックアウトマウスを用いて変形性関節症モデルを作成・解析したところ、変形性関節症の発症・進展が強く抑制された。さらに、ドミナントネガティブフォームのHIF2Aをアデノウイルスベクターを用いて関節内に導入したところ、変形性関節症の発症・進展が抑制された。また、HIF2Aの転写標的分子として10型コラーゲンの他、コラーゲン分解酵素MMP3, MMP9, MMP13、血管誘導分子VEGF、PTHrPシグナル関連分子としてIHH、PTH1R、その他の軟骨細胞制御分子としてRUNX2が同定し、野生型およびHIF2Aノックアウトマウスの変性軟骨細胞での発現レベルを確認した他、それぞれの分子のプロモーター領域を解析し、HIF2Aの応答部位を検索、同定した。HIF2Aの上流シグナルの探索としては、プロモーター解析によるスクリーニングにて、NF-κBシグナルの主要転写因子RELAがHIF2Aの近位プロモーターに結合してその発現を誘導することを示した。さらにRELAのみならず、NF-κBシグナルの主要な液性分子であるIL-1β、TGF-αがHIF2Aを誘導することを培養細胞レベルで確認した。さらに変形性関節症モデルマウスの組織切片を用いて、軟骨変性とHIF2Aの発現増加、およびRELAの細胞内局在の変化が同期することを明らかにし、NF-κBとHIF2Aの関連がin vivoでも見られることを証明した。
|
