2008 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトREV1、REV3、REV7超分子複合体の構造生物学的研究
| Project/Area Number |
20770089
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
橋本 博 Yokohama City University, 国際総合科学研究科, 助教 (40336590)
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| Keywords | DNA複製 / 損傷乗り越えDNA合成 / X線結晶構造解析 / DNAポリメラーゼ / タンパク質複合体 |
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| Research Abstract |
通常のDNA複製は複製型ポリメラーゼが行うが、複製中に鋳型DNAに損傷が生じると、複製型ポリメラーゼは損傷部位でDNA合成を停止してしまう。この場合、損傷に応じて適切な「損傷乗り越え型」DNAポリメラーゼ(TLSポリメラーゼ)が一時的にDNA合成を行うというTLSの単純なモデルが提唱されている。しかし実際は、複雑なタンパク質間相互作用が存在し、次々と相互作用相手を変え、一時的な超分子複合体が形成される。しかしその詳細は未だ明らかとされてない。REV1、REV3、REV7は多様な複合体を形成し、損傷乗り越えDNA合成(TLS)における中心的なDNAポリメラーゼである。REV3は損傷の種類に依存せずにDNA合成を行えるTLSポリメラーゼであり、REV7あるいはREV1と複合体を形成する。REV7はREV3のポリメラーゼ活性を促進する機能を有する。REV3のDNA合成は「誤りがち」で、大部分の突然変異導入に関与する。REV3は、哺乳類において唯一生存に必須なTLSポリメラーゼであることも興味深い。本研究では、X線結晶構造解析法によって、ヒトREV1、REV3、REV7の複合体形成のメカニズムを解明することを目的とする。申請者は、REV7とREV3フラグメントとの複合体の結晶化に成功し、さらなる結晶化条件の検討により、構造解析可能な結晶を得た。結晶のX線回折データは国内の放射光施設を利用した。様々な構造解析法を試みた結果、最終的には重原子同型置換法によって、REV7-REV3複合体の結晶構造解析に成功した。現在、REV7-REV3複合体の構造精密化を進めているところである。
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[Presentation] Analysis of tetrameric structure of TDH2008
Author(s)
Itaru Yanagihara, Kumiko Nakahira, Hiroshi Hashimoto, Kiyohisa Ohnishi, Akihiro Morita, Takeshi Honda
Organizer
43th US-Japan Cholera and Other Bacterial Enteric Infections Joint Panel Meeting
Place of Presentation
Fukuoka, Japan
Year and Date
20081117-19
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[Presentation] Structural studies of human PCNA mutant, REV6-12008
Author(s)
Asami Hishiki, Hiroshi Hashimoto, Yuji Masuda, Shinya Saijo, Aya Serizawa, Kenji Kamiya, Haruo Ohmori, Toshiyuki Shimizu, Mamoru Sato
Organizer
XXI Congress of the International Union of Cryst allography
Place of Presentation
Osaka, Japan
Year and Date
20080823-31
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