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2009 Fiscal Year Annual Research Report

2状態構造平衡モデルに基づいたM-フィコリンの異物認識機構の解明

Research Project

Project/Area Number 20770132
Research InstitutionMitsubishi Kagaku Institute of Life Sciences

Principal Investigator

谷生 道一  Mitsubishi Kagaku Institute of Life Sciences, 研究部門・蛋白質立体構造研究グループ, 特別研究員 (10416662)

Keywords自然免疫 / 異物認識 / 蛋白質 / 生物物理 / 構造平衡 / フィコリン / NMR / Brevibacillus choshinensis
Research Abstract

フィコリンは、N末端側のコラーゲン様(COL)ドメインとC末端側のフィブリノーゲン様(FBG)ドメインで構成される病原体認識タンパク質である。我々は、ヒトM-フィコリンのFBGドメイン(FD1)の構造機能研究から、M-フィコリン異物認識領域に病原体認識に関わる2状態構造平衡が存在すると予想し、これまでにpH依存性2状態平衡の存在の証明、およびそれに関与するヒスチジン残基の同定に成功した。本年度は、(1)2状態平衡に伴う立体構造およびダイナミクス変化についての知見を得るためのFD1のNMR解析、(2)急性期タンパク質C反応性タンパク質(CRP)との相互作用と病原体認識との関与について解析を試みた。(1)[α-^<15>N]ヒスチジン標識FD1のNMR解析から、基質結合に関与する3残基のヒスチジンのうち、信号帰属が成された2残基の^<15>N化学シフト値には、pHに依存した明確な変化が無く、2状態構造平衡に関する情報を得ることは出来なかった。現在、さらなる条件検討を行っている。(2)CRPとフィコリンは、相互作用することにより、それぞれ個々では認識しにくい病原体を認識・排除するために相補的に働くことが明らかとなってきている。しかし、その相互作用は非常に弱く、詳細な分子機構については明らかではない。我々は、CRPとM-フィコリンの相互作用解析を、非常に弱い相互作用の検出に適しているゾーンアフィニティークロマトグラフィーを用いて解析した。その結果、CRPは、M-フィコリンのFBGドメインとCOLドメインの境界付近に弱く結合し、その結合はCOLドメインがFBGドメインの付け根付近で大きく折れ曲がることでより強くなることが示唆された。

  • Research Products

    (4 results)

All 2009

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Binding site of C-reactive protein on M-ficolin2009

    • Author(s)
      Michikazu Tanio
    • Journal Title

      Molecular Immunology 47

      Pages: 215-221

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Brevibacillus choshinensis分泌発現系を用いたアミノ酸選択的安定同位体標識試料作成2009

    • Author(s)
      谷生道一、楠英樹、田中利好、田中剛史、河野俊之
    • Organizer
      第48回NMR討論会
    • Place of Presentation
      九州大学医学部百年講堂
    • Year and Date
      20091110-20091112
  • [Presentation] M-フィコリンのC反応性タンパク質結合部位2009

    • Author(s)
      谷生道一、河野俊之
    • Organizer
      日本生物物理学会第47回年会
    • Place of Presentation
      アスティとくしま
    • Year and Date
      20091030-20091101
  • [Presentation] Brevibacillus choshinensisを用いた組換えタンパク質の分泌生産および安定同位体標識試料調製2009

    • Author(s)
      谷生道一、田中利好、田中剛史、河野俊之
    • Organizer
      日本蛋白質科学会第9回年会
    • Place of Presentation
      熊本全日空ホテルニュースカイ
    • Year and Date
      20090520-20090522

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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