2008 Fiscal Year Annual Research Report
新概念、リンパ管新生がもたらすがん標的化リポソームDDSへの影響
| Project/Area Number |
20790041
|
|---|
| Research Institution | University of Shizuoka |
|---|
Principal Investigator |
清水 広介 University of Shizuoka, 薬学部, 助教 (30423841)
|
|---|
| Keywords | DDS / リポソーム / がん / リンパ管新生 / EPR効果 |
|---|
| Research Abstract |
本研究の目的は、リポソームを用いたがんへの標的化DDSにおける腫瘍リンパ管新生の影響を解明し、がん治療の効率化を目指すことである。これまでに各種がん細胞におけるリンパ管促進因子VEGF-Cの発現を確認し、細胞による発現の違いを確認している。そこでまずVEGF-Cの発現の高い細胞および低い細胞を選出し、マウスに皮下移植してそれぞれの固形がん担がんマウスを作製し、免疫染色法を利用することで固形がん中のリンパ管新生の誘導について比較検討を行った。その結果、VEGF-Cを多く発現したがん細胞の固形がんにおいて、新生リンパ管が多く分布していることが確認された。またVEGF-Cの受容体であるVEGFR3、リンパ管内皮細胞のマーカーであるLYVE-1の発現についてウエスタンブロッティング法により確認したところ、同固形がんにおいて高い発現が確認された。次に放射標識したPEG修飾リポソームを調製し、各担がんマウスの固形がん内へ局所投与を行い、その後のリポソームの体内動態について検討を行った。その結果、固形がんにおけるリンパ管新生の誘導の程度により、リポソームのがん組織での貯留に違いがあることが確認された。一方、リンパ管新生非誘導がんの作製に向け、VEGF-CのmRNAを標的とするshRNAを発現するようなDNA配列を設計し、プラスミドDNAに組み込むことでVEGF-C標的化shRNA発現ベクターの構築を行った。構築したプラスミドベクターをVEGF-Cを発現するがん細胞に遺伝子導入し、VEGF-Cの発現を調べたところ、VEGF-Cの発現がノックダウンできていることが確認された。これまでの結果を踏まえ、現在この細胞を用いて、腫瘍リンパ管新生が与えるがん標的化リポソームDDSへの影響についてのより詳細な検討を実施している。
|
