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2009 Fiscal Year Annual Research Report

神経軸索におけるABCA1の役割と活性制御機構の解明

Research Project

Project/Area Number 20790091
Research InstitutionNational Institute of Health Sciences

Principal Investigator

奥平 桂一郎  National Institute of Health Sciences, 機能生化学部, 主任研究官 (10425671)

Keywords脂質 / 神経
Research Abstract

本研究では、膜トランスポーターABCA1の神経細胞の軸索または成長円錐近辺における役割と活性制御機構の解明を目的とする。本年度は、ラット脊髄後根神経節(dorsalroot ganglion (DRG))細胞を用いて、神経突起伸長とABCA1の発現との関係について検討した。
DRG細胞のABCA1発現量をコントロールする目的で、ABCA1に対するsiRNAを各種トランスフェクション試薬で細胞に導入し、ABCA1タンパク質発現量を調べをところ、Lipofectamine RNAiMAXを使用した際に、良好なノックダウン効率が得られることが明らかになった。DRGの神経突起伸長は、細胞を固定した後、神経細胞のマーカーてある抗β3-tubulin抗体と二次抗体Alexa555を用いて細胞を染色し、観察した。ABCA1をノックダウンした細胞とコントロールの細胞において、細胞を撒種してから6日後及び9日後の突起伸長を比較したところ、ほとんど差は認められなかった。このことから、突起伸長反応にABCA1は関与しないことが示唆された。次に、DRGを突起伸長させた後、メスにより物理的に神経突起を切断して、さらに4時間後から3日後の細胞の状態を観察した。切断により神経突起の退縮から、一部修復が起こると考えられ、ABCA1をノックダウンしたDRGにおいては、コントロールと比較して、修復が遅れているか、ほとんど起きていないことが分かった。この結果は、神経の修復にABCA1が重要な役割を果たしている可能性を示唆している。

  • Research Products

    (3 results)

All 2010 2009 Other

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] Binding of PDZ-RhoGEF to ATP-binding cassette transporter Al (ABCA1) induces cholesterol efflux through RhoA activation and prevention of transporter degradation

    • Author(s)
      Okuhira, et al.
    • Journal Title

      The Journal of Biological Chemistry (印刷中)

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] グアニンヌクレオチド交換因子によるABCA1活性制御機構2010

    • Author(s)
      奥平桂一郎
    • Organizer
      日本薬学会第130年会
    • Place of Presentation
      岡山
    • Year and Date
      2010-03-30
  • [Presentation] ABCA1相互作用タンパク質とRhoAによるHDL形成制御機構2009

    • Author(s)
      奥平桂一郎
    • Organizer
      第51回日本脂質生化学会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      2009-07-31

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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