2008 Fiscal Year Annual Research Report
ホスホリパーゼCεによる炎症性サイトカイン産生制御の機構の解明
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20790229
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
枝松 裕紀 Kobe University, 医学研究科, 助教 (70335438)
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| Keywords | サイトカイン / 慢性炎症 / 尋常性乾癬 / 疾患モデル動物 / 癌 / ホスホリパーゼ / T細胞 / 免疫 |
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| Research Abstract |
ホスホリパーゼCε(PLCε)による炎症性サイトカイン産生の制御機構を、PLCεノックアウトマウス、トランスジェニックマウス、およびそれらから調製した初代培養皮膚細胞を用いて解析した。PLCεノックアウトマウスはハプテン誘発性の接触性皮膚炎に対し抵抗性を示す。そのサイトカイン発現について、それらのmRNA量を定量RT-PCRで解析し、ノックアウトマウスでの発現誘導低下を見出した。さらに、免疫組織化学め結果、ノックアウトマウスでのサイトカイン発現減少が主としてPLCεを発現している表皮ケラチノサイト、真皮線維芽細胞に生じていることを見出した。一方、接触性皮膚炎に関与するT細胞の浸潤には全く異常が認められなかった。そこで、マウス皮膚細胞の初代培養系を用いた解析を行った。T細胞が産生する炎症性サイトカインでこれらの細胞を刺激し、その効果を見たところ、ノックアウトマウス由来細胞では炎症性サイトカインの産生誘導が著しく低下していることが分かった。次いで、T細胞由来サイトカインによるPLCε活性化を、細胞内カルシウム動員を指標に測定した。その結果、これらT細胞由来サイトカインは直接にはPLCεを活性化することができず、PLCεの活性化は間接的に生じている可能性が示唆された。また角化細胞特異的にPLCεを過剰発現するトランスジェニックマウスの作出し、その表現型解析により、このマウスがヒト尋常性乾癬に酷似した慢性皮膚炎を発症することを明らかにした。そのマウスより調製した初代培養ケラチノサイトにおける、サイトカインの過剰発現を見出し、PLCεがサイトカイン産生に関与することを示した。
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