大腸菌内ウイルスゲノム改変系を利用したHSVウイルス制御因子の解析

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20790361
• Research Institution: National Institute of Infectious Diseases
• Principal Investigator: 田中 道子 National Institute of Infectious Diseases, 感染病理部, 主任研究官 (10356248)
• Keywords: 組換え単純ヘルペスウイルス / 大腸菌

Research Abstract

単純ヘルペスウイルス(HSV)は基礎研究の分野で古くから勢力的に解析が行われ、また近年では遺伝子治療ベクターとして臨床研究の分野でも注目を集めている。いずれにおいても第1段階として組換えウイルスの作製が必須である。しかし、従来の組換えウイルス作製技術は煩雑でありかつ、かなりの長期間を要した。
本研究の目的はこれまでに申請者が開発してきた独自の大腸菌内における組換えウイルスゲノム改変法を利用し、HSVの様々な発現タンパク質の詳細な生物学的解析を行い、HSVの病原性の解明に近づくことである。今年度はさらに、I-SceIというホーミングエンドヌクレアーゼを利用したさらなる改変系の発展を試み、いくつかの遺伝子の変異に成功した。また、HSV-1においては未だに報告例のない数少ない遺伝子であるUL7に着目し、その欠損HSV-1 mutantの作製に成功、性状解析を行った。更に、新たにMASS解析も取り入れることでUL7と相互作用する宿主遺伝子も新規に発見し、報告済みである。現在これらの系を組み合わせ、HSV病原性に対して重要と思われるいつくかの他の因子UL13, Us3, UL47, ICP22等についても解析を行っている。

Research Products

• [Journal Article] The product of the Herpes simplex virus 1 UL7 gene interacts with a mitochondrial protein, adenine nucleotide translocator 2. (2008)
  • Author(s): Tanaka M., Sata T., and Kawaguchi Y.
  • Journal Title: Virology Journal 5 Pages: 1-13
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of a Physiological Phosphorylation Site of the Herpes Simplex Virus 1-Encoded Protein Kinase Us3 Which Regulates Its Optimal Catalytic Activity In Vitro and Influences Its Function in Infected Cells. (2008)
  • Author(s): Kato A., Tanaka M., Yamamoto M., Asai R., Sata T., Nishiyama Y., and Kawaguchi Y.
  • Journal Title: Jounal of Virology 82 Pages: 6172-6189
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Simultaneous Tracking of Capsid, Tegument, and Envelope Protein Locali zation in Living Cells Infected with Triply Fluorescent Herpes Simplex Virus 1. (2008)
  • Author(s): Sugimoto K., Uema M., Sagara H., Tanaka M., Sata T., Hashimoto Y., and Kawaguchi Y.
  • Journal Title: Jounal of Virology 82 Pages: 5198-5211
  • Peer Reviewed