2008 Fiscal Year Annual Research Report
構造生物学的手法による自然免疫及びIL-18機能制御と新規免疫調節薬の開発
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20790723
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
大西 秀典 Gifu University, 大学院・医学系研究科, 助教 (60381620)
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| Keywords | 自然免疫 / IL-18 / Toll-like receptor / MyD88 / タンパク立体構造 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、当研究室で溶液タンパク立体構造の決定を完了したMyD88と、MyD88と相互作用する受容体及びアダプター分子群の相互作用の詳細をNMR法または結晶化蛋白のX線解析によって構造生物学的に明らかにすることで、シグナルの流れを調節するような薬剤候補物質をスクリーニングすることである。特に、本年度は(1)TLRファミリーやアダプター分子のTIRドメインタンパクの精製スクリーニングを行った。この結果TLR1、TLR2、TIRAP、TRAMそれぞれTIRドメインタンパクの発現系の構築に成功している。またTLR4については複数の発現系を構築し、現在精製条件の検討中である。IL-18Rβ、TRIFについては発現ベクターの構築を行った。(2)MyD88変異体群を使用したReporter gene assayからTLR1/2シグナル系で使用されるMyD88の機能的残基が、TLR4シグナルと共通していることが判明した。(3)TIRAP-TIRドメインの結晶化スクリーニングを行った。TIRAP-TIRは溶液中で自己多量体化する性質があるためか、現在のところ結晶化には至っていない。(4)ヘテロTIRドメイン複合体構造解析に向けて、直接結合しうるTIRドメインのスクリーニングをGSTプルダウン実験で行った。この結果、TLR1、TLR2は直接結合し、またTIRAPはTLR1、TLR2、MyD88の全てと直接結合することが判明した。しかし、従来TLR3を除く全てのTLRと結合すると言われていたMyD88は、TIRAPとは結合するが、TLR1とは結合せず、TLR2との結合もアフィニティーがかなり弱いことが示された。このことから、受容体-アダプター分子間の結晶化スクリーニングにはTLR2あるいはTLR1とTIRAPの組み合わせが適しているのではないかと考えられた。
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[Journal Article] 小児気管支喘息患児と親又は保護者のQOL調査票簡易改訂版2008(GIFU)2008
Author(s)
近藤直実, 平山耕一郎, 松井永子, 寺本貴英, 金子英雄, 深尾敏幸, 折居建治, 川本美奈子, 舩戸道徳, 大西秀典, 川本典生, 森田秀行, 木村豪, 名田匡利, 徳見哲司, 堀友博, 渡邊倫子
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Journal Title
アレルギー 57
Pages: 1022-1033
Peer Reviewed
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[Presentation] 母乳栄養とアレルギー疾患発症との関連について. シンポジウム3環境因子がアレルギー疾患の発症に及ぼす影響と発症予防の可能性について2008
Author(s)
川本美奈子, 大西秀典, 川本典生, 森田秀行, 松井永子, 金子英雄, 寺本貴英, 深尾敏幸, 白木誠, 岩砂眞一, 近藤直実
Organizer
第45回日本小児アレルギー学会
Place of Presentation
横浜
Year and Date
2008-12-13
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[Book] Allergy Frontiers (volumel Allergy Frontiers : Epigenetics, Allergens and Risk Factors)2009
Author(s)
Kondo N, Matsui E, Kaneko H, Fukao T, Teramoto T, Kato Z, Ohnishi H, Nishimura A : Genetics of Pediatric Asthma. In : Pawankar R, Holgate ST, Rosenwasser LJ eds
Total Pages
442
Publisher
Springer
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