前立腺癌患者に対する癌ワクチン療法に応用できる腫瘍関連抗原由来ペプチドの同定

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20791130
• Research Institution: Kinki University
• Principal Investigator: 南 高文 Kinki University, 医学部, 助教 (70340809)
• Keywords: 前立腺癌 / 癌ワクチン / HLA-A3 supertype alleles

Research Abstract

近年、多くの腫瘍抗原がcytotoxic T lymphocytes(CTLs)を誘導することが確認されており、その腫瘍抗原のペプチドを利用した癌ペブチドワクチン療法の有効性が報告されている。現在、癌ワクチン療法の適応はHLA-A2, -A24陽性患者のみで臨床に応用できるHLA-A3 supertype alleles拘束性の癌ペプチドは無いのが現状である。この状況を打開するためには日本人の46%が陽性と思われる第3のMHC class I分子、HLA-A3 super type拘束性のペプチド同定を目的とし、研究に着手した。
本研究に対し同意を得た前立腺癌患者より末梢血を50ccを採取し、Ficoll-Conray液による末梢血単核球細胞を遠心分離とHLA-Aをanti-HLA-A11 monoclonal antibody, anti-HLA-A31 mAbとanti-HLA-A33 mAbを便用しフローサイトメトリーにて同定しHLA-A3 supertype allelesのうちHLA-A11, -A31, -A33陽性のものを対象とした。
そめ結果、7種類の前立腺癌関連抗原(SART2, CypB, PTH-rP, HER2neu, EGFR, MRP3, EZH2)のクラスI拘束性ペプヂドを1抗原10種類合成した。次にLNCaPにHLA-A11, -A31, -A33分子を発現させる為に真核細胞の発現ベクターPcr3. 1にHLA-A1101, -A3101, -A3303プラスミドcDNAを挿入しHLA-A1101, -A3101, -A3303強発現LNCaPトランスフェクタントを樹立することができた。
また、約20例ほどのHLAタイピング及びPBMCの採取をすることができた。