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2008 Fiscal Year Annual Research Report

唾液腺多形性腺腫の低酸素環境における増殖機構

Research Project

Project/Area Number 20791331
Research InstitutionNiigata University

Principal Investigator

丸山 智  Niigata University, 医歯学総合病院, 講師 (30397161)

Keywords唾液腺多形性腺腫 / 低酸素 / HIF-1α / VEGF / pVHL / SM-AP / ACC
Research Abstract

本年度は以下の実験をおこない、興味ある知見をえた。
1) 細胞培養
ヒト唾液腺多形性腺腫より樹立したSM-AP1/4および転移能の異なるヒト腺様嚢胞癌由来細胞ACC2/Mの各細胞系を、通常の培養条件(10%FCS/5%CO_2)と低酸素条件(1%0_2/5%CO_2/94%N_2)とで5時間培養した後、遺伝子発現の検索のために、細胞回収して全RNAを抽出し、フェノール・クロロホルム法により精製してcDNAを調整した。免疫細胞化学および免疫沈降法のためには、細胞を培養し、経時的に4%パラフォルムアルデヒドにて固定するとともに、細胞層および培養上清を区別して蛋白質を各々回収した。
2) HIF分解抑制関連分子解析
既知のHIF分解関連分子・癌抑制遺伝子pVHLの遺伝子ならびに蛋白質レベルの発現を検索した。pVHLは培養条件による有意な発現レベルの差はみとめられなかったが、細胞間ではACCよりSM-APで低く、SM-AP細胞間では、導管上皮細胞性格のSM-AP1で筋上皮細胞性格のSM-AP4より発現が低い傾向がみられた。蛋白質発現はSM-AP細胞系では遺伝子発現同様の傾向が得られた。
3) HIF誘導関連遺伝子解析
HIFにより誘導される遺伝子のひとつVEGFの遺伝子および蛋白質の発現レベルを検索した。遺伝子発現に関しては、高転移株ACCMおよび多形性腺腫由来細胞SM-APで、低酸素下のVEGFの高発現傾向があった。とくに、定量的PCR法で、VEGF_<121/165>のスプライスバリアントの高発現が確認された。SM-AP細胞系では、低酸素下で蛋白質発現が同様に上昇する傾向がえられた。以上の結果をもとに、次年度はさらにそれぞれの分子機構の詳細を追跡する実験展開をはかりたい。

  • Research Products

    (7 results)

All 2009 2008

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Keratinocyte growth factor colocalized with perlecan at the site of capsular invasion and vascular involvement in salivary pleomorohic adenomas2009

    • Author(s)
      Maruyama S
    • Journal Title

      J Oral Pathol Med. 38(4)

      Pages: 377-85

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Matrix metalloproteinase 7 and perlecan in oral epithelial dysplasia and carcinoma in situ : an aid for histopathologic recognition of their cell proliferation centers2009

    • Author(s)
      Tilakaratne WM, Maruyma S, et.al.
    • Journal Title

      J Oral Pathol Med. 38(4)

      Pages: 348-55

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Lymphoepithelial cyst of the parotid gland : its possible histopathogenesis based on clinicopathologic analysis of 64 cases2009

    • Author(s)
      Wu L, Maruyma S, et.al.
    • Journal Title

      Hum Pathol. 40(5)

      Pages: 683-92

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] FGF7/KGF enhanced proliferation but suppresses invasion of adenoid cystic carcinoma cells2008

    • Author(s)
      Maruyama S
    • Journal Title

      Oral Oncology 12(1)

      Pages: 243-50

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Survival of salivary pleomorphic adenoma cells in hypoxic condition2008

    • Author(s)
      Maruyama S
    • Organizer
      14th International Assoaciation of Oral Pathologists
    • Place of Presentation
      San Francisco, USA
    • Year and Date
      20080622-26
  • [Presentation] FGF7/KGF enhances cell proliferation but inhibits cell invasion of adenoid cystic carcinoma cells2008

    • Author(s)
      Maruyama S
    • Organizer
      The 12th International Congress of Oral Cancer
    • Place of Presentation
      Shanghai, China
    • Year and Date
      20080522-25
  • [Presentation] 口腔粘膜上皮内癌におけるp53遺伝子変異解析2008

    • Author(s)
      丸山智
    • Organizer
      第97回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      金沢市, 日本
    • Year and Date
      20080515-17

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Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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