2008 Fiscal Year Annual Research Report
難治性口腔粘膜疾患発生に関する粘膜上皮・真皮における免疫応答の細胞生物学的研究
Project/Area Number |
20791518
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Research Institution | Hiroshima University |
Principal Investigator |
西 裕美 Hiroshima University, 病院, 助教 (70403558)
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Keywords | 炎症性口腔粘膜疾患 / 口腔粘膜上皮細胞 / 歯肉線維芽細胞 / Th1サイトカイン / Th2サイトカイン |
Research Abstract |
扁平苔癬など炎症性口腔粘膜疾患発症の過程には, 病変部に浸潤するリンパ球より産出される炎症性サイトカインが重要な役割を担っている. これまでに我々は, 口腔粘膜上皮・歯肉線維芽細胞において, Th1サイトカインであるINF-γの刺激により著明に産生されるCXCL 9, 10, 11が, Th2サイトカインであるIL-4の調節をうけることを報告した(JDent Res. 2008)、INF-γの刺激により発現する遺伝子の細胞内シグナル伝達にはSTAT 1蛋白のリン酸化が関連しているとの報告があるが、口腔粘膜上皮・間葉細胞におけるTh1, Th2サイトカインによるシグナル伝達の調節機構は不明である. 今回我々はhTERT遺伝子を導入して不死化させた歯肉線維芽細胞(GT1)を用いて, Th1, Th2サイトカインによるSTAT 1蛋白のリン酸化修飾を検討した. 実験方法)サブコンフレンスに培養したGT1にINF-γと各種シグナル伝達阻害剤を同時添加し, 12時間後にRNAを抽出, CXCL 10の発現をreal-time PCR法を用いて検討した.GT1におけるINF-γ, TKF-α, IL-4単独添加, 同時添加によるSTAT 1蛋白のリン酸化修飾を経時的にWestern blotting法を用いて検討した. 結果と考察)GT1においてINF-γで著しく増加するCXCL 10の発現はJAK/STATシグナル阻害剤により抑制された. また, INF-γの添加によりSTAT 1リン酸化が経時的に増加した. INF-γによるSTAT 1のリン酸化がTNF-αの同時添加でさらに増加することに対し, IL-4の同時添加では抑制された. 以上より, 歯肉線維芽細胞においてINF-γでリン酸化されるSTAT 1は, TNF-α, IL-4によって調節を受け, CXCL 10などのケモカインの発現に関与することが示唆された. 本研究の成果は第62回NPO法人日本口腔科学会学術集会(2009年4月17目, 静岡)において発表を予定している.
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