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2008 Fiscal Year Annual Research Report

新奇相同組換え抑制システムの構造機能解析

Research Project

Project/Area Number 20870042
Research InstitutionThe Institute of Physical and Chemical Research

Principal Investigator

福井 健二  The Institute of Physical and Chemical Research, システム生物学統合研究チーム, 研究員 (00466038)

Keywords相同組換え / エンドヌクレアーゼ / MutS2 / X線結晶構造解析 / ミスマッチ修復系 / 高度好熱菌
Research Abstract

新奇の相同組換え抑制因子である、高度好熱菌MutS2エンドヌクレアーゼについて、その触媒ドメイン(C末端ドメイン)のX線結晶構造解析に成功した。その結果、MutS2のC末端ドメインは、RNaseEやDNaseIなど、配列非特異的なエンドヌクレアーゼと類似の構造を持つことが明らかとなった。一方、N末端ドメインは、相同組換えの初期中間体であるD-loop構造に強く結合し、そして、MutS2全長としては、相同組換え中間体を認識し、切断する活性を持つことを示した。これらの結果から、MutS2が、相同組換えの初期中間体をエンドヌクレアーゼ活性により解離させることで反応を抑制することが示唆された(Fukui et al.,(2008)J.Biol.Chem.283:33417-33427)。この成果は科学新聞に平成20年12月12日付で掲載された。
さらに、MutS2による相同組換え抑制機構にミスマッチ修復系関連因子がどのように関与するかを調べるため、プルダウンアッセイによる相互作用解析を行った。その際、プルダウンされた相互作用因子の同定に、LC-MSを用い、極めて感度の高い検出方法の確立に成功した。この手法を用いた解析により、ミスマッチ修復系酵素である高度好熱菌MutLがMutS2と相互作用することが明らかとなり、今後の展開に期待を抱かせる結果が得られた。

  • Research Products

    (2 results)

All 2008

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Crystal structure of MutS2 endonuclease domain and the mechanism of homologous recombination suppression2008

    • Author(s)
      Kenji Fukui, Noriko Nakagawa, Yoshiaki Kitamura, Yuya Nishida, Ryoji Masui, Seiki Kuramitsu
    • Journal Title

      Journal of Biological Chemistry 283

      Pages: 33417-33427

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Thermus thermophilus HB8のDNAミスマッチ修復システム2008

    • Author(s)
      福井健二, 飯野均, 満足美穂, 中川紀子, 増井良治, 倉光成紀
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学大会(BMB2008)
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド
    • Year and Date
      2008-12-12

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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