2020 Fiscal Year Annual Research Report
The study of progenitor dedifferentiation in mouse testis
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20H03168
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| Research Institution | Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
鈴木 伸之介 国立研究開発法人理化学研究所, バイオリソース研究センター, 訪問研究員 (00755994)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 精子幹細胞 / 培養系 / シングルセル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者のin vivoの解析から80%のマウス精子幹細胞 (SSCs: Spermatogonial Stem Cells)は非分裂期にあることや、SSCsへと脱分化することが報告されている分化の進んだ前駆細胞(progenitor)の中でも前期Progenitorのみが、SSCsへと脱分化する可能性が強いことも明らかにしている (Suzuki S et al., 2021, Cell reports)。本研究では、精巣内のProgenitorで生じるSSCsへの脱分化誘導メカニズムの全貌解明を目的とし、まず3種類の蛍光レポーターを用いて、休眠SSCs、活性SSCs、前期Progenitor、後期Progenitorをそれぞれ可視化しようと試みた。in vivoにおける単一細胞レベルの遺伝子発現解析から予測された後期Progenitor特異的な発現が確認されたDppa3に着目し、Dppa3プロモーターを利用したレポーターマウスの解析を行なった。その結果、申請者が定義した後期Progenitorを再分画することができた。一方で、レポーターの発現は初期の分化細胞でも確認され、本研究の目的は果たせなかったが、Reproductionへ投稿し、掲載が決定した。また、申請者が確立したIn vitro分化系における継時的な解析を行うため、単一細胞レベルで回収し、ライブラリー作成を行なった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
コロナウィルスの影響により、本年度予想していたin vitro分化系における遺伝子発現解析に必要な試薬の納品に遅れが出たため、シークエンスができなかった。また、本研究でしよう予定のレポーターマウスの解析結果が予想とは異なっていたため、他の候補の解析も必要となった。
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| Strategy for Future Research Activity |
in vitro分化系における単一細胞レベルでの遺伝子発現解析は、ライブラリーが作成できたっため、直ちにシークエンスし、解析さらに解析結果を評価する予定である。また、レポーターマウスに関しては、既存のレポーターマウスを再解析することにより本研究に使用できるマウスを決定する。
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Research Products
(3 results)
