2023 Fiscal Year Annual Research Report
DNA複製と相同性依存的修復の正確性維持機構を統御する反応の解明
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20H03186
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
高橋 達郎 九州大学, 理学研究院, 教授 (50452420)
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2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | ミスマッチ修復 / ツメガエル卵抽出液 / 相同組換え / ゲノム安定性 / DNA二重鎖切断損傷修復 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、ミスマッチ修復経路によるDNA合成エラー修復反応と、類似配列間の相同組換えの抑制反応それぞれの分子メカニズム、および二つの経路の分岐メカニズムを理解するため、ツメガエル卵抽出液を用いた試験管内再現系、および精製タンパク質による試験管内再構成系の二つの手法で研究を行っている。本年度は、昨年同定した相同組換えに関わるヘリカーゼの相互作用因子の解析を進め、この因子が当該ヘリカーゼのATP加水分解活性を促進することを示唆する結果を得た（熊本大学発生医学研究所の石黒啓一郎博士との共同研究）。また、先年度から引き続き、類似配列間相同組換え制御の部分反応を精製タンパク質を用いて再構成するなど、そのメカニズム解析を進めており、成果は論文としてとりまとめ段階にある。昨年度発見したミスマッチ修復におけるDNA鎖切断反応の新規制御についても、がん研究所大学保一博士と共同で、引き続き解析を進めた。加えて、DNA二重鎖切断損傷末端の削り込みメカニズムを検討し、MRNと呼ばれる多機能複合体、9-1-1と呼ばれるチェックポイントセンサー因子が、それぞれ重複してDNA二重鎖切断の削り込みと損傷チェックポイント活性化に機能する事を発見した。さらに、DNAを卵抽出液から効率良く回収する系を確立し、これら二つの因子がチェックポイント因子やヌクレアーゼの呼び込みに果たす役割を解明した。これらに加え、DNA複製、修復、ミスマッチ修復などに広く多面的な機能を持つ複製クランプ因子PCNAの動態制御を解析し、ツメガエル卵抽出液においてPCNAをDNAから取り外す因子、およびその制御を明らかにした。DNA二重鎖切断末端の削り込みに関する解析、およびPCNAの取り外しに関する解析については、本年度中に論文として報告済みである。
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| Research Progress Status |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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