2022 Fiscal Year Annual Research Report
Pharmacokinetic study on transporters in the xenobiotic detoxification among the liver, small intestine and kidney
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20H03401
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
楠原 洋之 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 教授 (00302612)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前田 和哉 北里大学, 薬学部, 教授 (00345258)
水野 忠快 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 助教 (90736050)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | オーファントランスポーター / 基質探索 / in vitroモデル / 薬物輸送 / スフェロイド / オルガノイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Slc17a1~4cKOマウスの腎臓から抽出したRNAに対してRNAseqを行い、トランスクリプトーム解析を実施いた。しかし有意な変化はみとめられず、野生型マウスと同一であった。またOATP過剰発現HEKに対して、RNAseqにより導入遺伝子以外のトランスポーターの発現変動も複数認められた。オーファントランスポーター機能の解明の上で、内因性トランスポーターの発現変動がアーチファクトを誘発する可能性がある。
小腸における薬物輸送に関わるトランスポーターを解明するための基盤技術として、小腸クリプト由来の未分化細胞の調製技術を活用し、領域の異なるクリプト由来の上皮細胞を取得した。SLC17A4などに加えて、P-gp、BCRP、MRP2のmRNAレベルの発現を検出した。阻害剤を利用し、阻害剤存在化において種々薬物の細胞内蓄積量を比較した結果、薬物によって阻害剤の感受性は異なり、複数のトランスポーターが発現することで、多様な化合物の吸収を抑制することが示唆された。核内受容体による発現誘導も認められるため、トランスポーター介在性の薬物相互作用を広く評価できる基盤技術となり得る。
ミトコンドリアに局在するAK4を強制発現させ、ミトコンドリアへの局在を確認した。AK2の基質であり、かつ腎毒性を誘発するAdefovirおよびそのプロドラッグ体を利用し、薬剤感受性を比較した。AK4の発現さらにadefovirを輸送するOAT1を一過的に発現させたが、薬剤感受性の増加は認められなかった。SLC35F6は、既報とは異なり、ミトコンドリアではなくリソソームへの局在が認められた。SLC35F6ホモログであるオーファントランスポーターSLC35F1について、細胞膜への局在と新たな基質化合物を複数同定することに成功した。当該トランスポーター機能の解明により、当該基質の動態が説明可能になると考える。
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| Research Progress Status |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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