2020 Fiscal Year Annual Research Report
Pathological elucidation of autism by using morphological multi-parameter analysis in neuron and microglia co-culture system
| Project/Area Number |
20H03597
|
|---|
| Research Institution | Niigata University |
|---|
Principal Investigator |
染矢 俊幸 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50187902)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
五十嵐 道弘 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50193173)
江川 純 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (80648527)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
|
| Keywords | 自閉スペクトラム症 / High Content Screening / Kinase inhibitor |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
自閉スペクトラム症（Autism Spectrum Disorder; ASD）のリスク遺伝子の変異を加えた培養神経細胞の変化を指標としてHigh Content Screeningの技術を用いて形態的マルチパラメータ（神経細胞数、神経突起長、シナプス数）を用いることとした。しかしこれまでにHCSによるシナプス数カウントの実験系が確立していないため、その実験系の確立を行った。シナプス発達および精神神経疾患に関連が報告されているKinase (AKT, TNIK, DYRK1A, TAOK2, GAK)に注目し(Crino, 2015; Duchon and Herault, 2016; Baltussen et al., 2018)、計5種類のKinase inhibitor（CP43, AKTi-1/2, Harmine, PF0626033, LRRK2IN-1, JH-II-127, MLi-2, GSK2578215A, SGC-GAK-1）をそれぞれ添加した。結果全てのKinase inhibitorにおいて（それぞれn=6）DMSOのみ添加のコントロール(n=6)に比して神経突起長、シナプス数が有意に減少していることを確認した。そのうちSGC-GAK-1は近年確立された非常に選択性の高い阻害剤であり(Asquith et al., 2019)、そのリン酸化阻害作用が神経発達に負の影響（神経突起長およびシナプス数の減少）を与えるという結果をまとめて、NEURO2022（2022年７月）に演題採択され発表予定である。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID-19の影響により発注した抗体やKinase inhibitorの輸送に大きな遅れが出たため。
|
| Strategy for Future Research Activity |
NLGN3やCNTN5など有力な自閉スペクトラム症のリスク遺伝子の変異導入用のベクターを作成し、培養神経細胞に導入して、神経発達に与える影響（神経突起長およびシナプス数）についてHigh Content Screeningを用いて明らかにする。
|
