2022 Fiscal Year Annual Research Report
合成糖鎖の代謝取り込みを利用した好熱性古細菌における翻訳後修飾糖鎖の機能解析
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20J20284
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
平尾 宏太郎 大阪大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2020-04-24 – 2023-03-31
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| Keywords | リン酸化 / グリコシル化 / イノシトール / N-グリカン / 超好熱菌 / 好熱性古細菌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
N結合型糖鎖（N-グリカン）は，タンパク質のアスパラギン側鎖に結合した翻訳後修飾糖鎖で，多くの生物に普遍的に存在し，様々な生命現象に関与する．本研究では，超好熱性古細菌 Thermococcus kodakarensisに着目し，そのN-グリカンの耐熱性への寄与を合成化学的なアプローチによって迫ることを目的とした．
昨年度までに，合成N-グリカンを用いた構造解析の結果から，T. kodakarensisのN-グリカンの構成糖であるmyo-イノシトールリン酸の立体化学がL-myo-イノシトール-1-リン酸であることが示唆された．本年度は，L-myo-イノシトール-1-リン酸を有するN-グリカンを合成を達成した．さらに，NMR解析により，この合成糖鎖が単離糖鎖と良い相同性を示し，myo-イノシトール-1-リン酸の立体化学をL-myo-イノシトール-1-リン酸と確定した．本研究はT. kodakarensisのN-グリカンを天然構造に限らず，非天然構造，標識糖鎖の合成を供給できるため，糖鎖の耐熱性への寄与を，糖鎖構造に基づいて解析することを可能とする．
糖鎖の機能を解析するためには，タンパク質との複合化が鍵となる．本研究では，T. kodakarensisの糖鎖生合成経路に着目し，合成糖鎖を代謝的に取り込ませることで生体内で糖鎖とタンパク質との複合化を計画した．ドリコールリン酸GalNAcはN-グリカンの生合成初期段階の中間体であり，N-アセチル部分へアジド基を導入することでプローブ化した生合成中間体を設計した．その合成では，亜リン酸化GalNに対し，ドリコールとのカップリング後，アジド基を導入し，達成した．本プローブ化糖脂質は，生細胞へ代謝的に取り込ませることでN-グリカンの生合成へ干渉し，合成糖鎖のタンパク質への付加を可能とする．
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| Research Progress Status |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] Structural Determination and Chemical Synthesis of the N-Glycan from the Hyperthermophilic Archaeon Thermococcus kodakarensis2023
Author(s)
Hirao, K.; Speciale, I.; Notaro, A.; Manabe, Y.; Teramoto, Y.; Sato, T.; Atomi, H.; Molinaro, A.; Ueda, Y.; Castro, D. C.; Fukase, K.
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Journal Title
Angewandte Chemie International Edition
Volume: 62
Pages: e202218655
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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