2022 Fiscal Year Annual Research Report
自然免疫受容体Mincleのリガンド合成を基盤とした分子認識および細胞内挙動解析
Project/Area Number |
20K05733
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Research Institution | Keio University |
Principal Investigator |
松丸 尊紀 慶應義塾大学, 理工学部(矢上), 助教 (90636549)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | 糖脂質 / 自然免疫 / 生物活性 / 生物有機化学 |
Outline of Annual Research Achievements |
自然免疫受容体の一種である Mincleは、マクロファージなどの免疫細胞表層に発現し、微生物由来の複合脂質などを認識することで自然免疫を制御する。本研究においては、Mincleの複合脂質リガンドの合成法の確立および関連分子の合成を行うとともに、得られた化合物に対する生物活性評価より、特にリガンド脂質部位とMincleの構造活性相関を明らかにすることを目指した。またMincleのリガンド 認識による細胞内挙動の解析を志向し、確立したリガンド合成手法を用いた蛍光標識プローブの創製を行った。 まず特徴的な脂質構造を有し、強力なMincleを介したシグナル活性を示すマラセチア菌由来の糖脂質の合成を達成した。脂質部位に存在するヒドロキシ基の立体化学が不明であったことから、光学分割を用いた効率的なヒドロキシ脂肪酸エステルの調製法を確立するとともに、天然型糖脂質構造の合成法を確立した。さらに脂質部位改変構造を含む種々の誘導体を合成し化合物ライブラリを構築した後、活性評価へ展開することで構造活性相関の解析を行うことに成功した。また結核菌由来の糖脂質構造において、Mincleと糖脂質リガンドの結合モデルを基に設計した脂質部位改変型誘導体の合成ルートを確立するとともに、種々の誘導体合成を行った。得られた化合物の活性評価を行うことで、これまで不明瞭であったリガンド脂質部位とMincleの相互作用を解析した。さらにMincleおよびリガンドの細胞内挙動を解析するため、Mincleと糖脂質リガンドの結合モデルより設計した蛍光標識分子プローブの合成法開発と蛍光標識体合成に成功した。得られた分子プローブを用いた生細胞イメージングによりMincle依存的な細胞内挙動解析にも成功した。
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