2022 Fiscal Year Annual Research Report
がんスフェロイドのアポトーシス誘導に関与するヒアルロン酸－TRPチャネル制御系
| Project/Area Number |
20K06437
|
|---|
| Research Institution | Nihon University |
|---|
Principal Investigator |
山崎 純 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (50230397)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡村 和彦 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 准教授 (00224056)
内田 邦敏 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 准教授 (20581135)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| Keywords | TRPチャネル / ヒアルロン酸 / がんスフェロイド / アポトーシス / 細胞浸潤 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
がん細胞のアポトーシス回避に寄与するスフェロイド形成におけるヒアルロン酸（HA）とTRPチャネルの関与を明らかにすることが本研究の目的である。
令和2年度に、イヌ（AZAC-B）ならびにヒト乳がん細胞（MCF-7）のアポトーシス回避に関与するものとして、TRPV1やV6などのイオンチャネル候補が得られた。poly-HEMAコートあるいは低接着加工が施された培養ディッシュとＵ字型ウェルにおいて、MCF-7のスフェロイド形成はヒアルロン酸（HA）合成阻害薬4-methylunbelliferone (4-MU)によって著しく抑制されたが、予想に反してTRPV1活性化薬capsaicinあるいはTRPV1阻害薬AMG9810によっては影響をうけなかった。
令和3年度の研究によって、HA産生の阻害によってTRPV1発現量は増加した上に、外来性にHAを投与するとTRPV1チャネル活性が直接抑制されたことから、内因性HAによってTRPV1チャネルを介する細胞内機構が抑制を受けているのではないかと推測された。令和4年度の結果から、内因性HAによってTRPV1によるスフェロイド形成阻害効果が強くマスクされている可能性を考慮に入れる必要があった。
他方で、トランスウェルを用いた細胞遊走機能実験を実施したところ、カルチャーインサートの小孔を通過するAZACB細胞数はcapsaicinで抑制された。また、4-MUでその抑制は増強され、外来性にHAを投与するとその抑制は解除された。以上から、乳癌細胞の浸潤に対するTRPV1とHA合成との関連性が明らかになった。これらの研究成果を踏まえると、令和3年度に完成した乳癌細胞の3次元真皮浸潤モデルを用いて、スフェロイドからのがん細胞の浸潤に焦点を当てることによって、遠隔組織への転移抑制を念頭に置いた研究の展開が期待できる。
|
