ヒトMHC拘束性機能的ヒトT細胞の解析を可能にする免疫ヒト化マウスの作出

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20K06469
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 米谷 耕平 京都大学, iPS細胞研究所, 特定拠点助教 (50437258)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 胸腺上皮細胞

Outline of Annual Research Achievements

ヒトiPS細胞から胸腺上皮細胞(Thymic epithelial cell: TEC)を分化誘導するために、ドキシサイクリン依存的に任意のタイミングで、TECの発生に必要と考えられる転写因子を発現させることのできるiPS細胞を樹立した。
樹立したiPS細胞をアクチビンAとGSK3betaの阻害剤を用い、TECの発生起源である内胚葉に分化させた。その後ドキシサイクリンを添加し、導入した転写因子を発現させた。ドキシサイクリン存在下でさらに培養を継続し、得られた細胞の遺伝子発現を定量的PCR法にて検証した。その結果、 胸腺上皮細胞(TEC)が発現する遺伝子の内、EPCAM、ケラチン5(KRT5), DLL4を発現していることが確認された。一方、成熟TECが発現しているHLA-DR、AIREなどは発現が認められなかった。これらの結果から、iPS細胞から誘導された細胞は、胸腺上皮前駆細胞様細胞(TEC-progenitor like cell: TEPLC)である可能性が示唆された。
iPS細胞由来TEPLCを機能的なTECに誘導するための成熟過程では、T細胞前駆細胞を含むTEC以外の細胞との相互作用が必要と考えられた。そこで最終年度では、iPS細胞由来TEPLCを胸腺上皮細胞欠損マウスに移植し、生体内の環境で、移植したiPS細胞由来TEPLCが機能的な成熟TECに分化するかどうかの検証を行なった。